Anticorpo policlonale anti-RPRD1B per WB, IHC-P, ELISA - Q9NQG5

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di RPRD1B

• RPRD1B (noto anche come CREPT, proteina correlata al ciclo cellulare e sovraespressa nei tumori) è una proteina nucleare che regola la trascrizione interagendo con il dominio C-terminale (CTD) fosforilato della subunità POLR2A della RNA polimerasi II.
• Partecipa alla defosforilazione del CTD tramite RPAP2 e aumenta l'espressione di CCND1 (ciclina D1) promuovendo il legame della RNA polimerasi II al promotore di CCND1.
• RPRD1B impedisce alla RNA polimerasi II di oltrepassare il sito di terminazione all'estremità 3' e può facilitare il suo riciclo verso il promotore attraverso la formazione di anse della cromatina.
• Inoltre, aumenta l'espressione di altri geni correlati al ciclo cellulare, come CDK2, CDK4, CDK6 e ciclina E, senza influenzare CDKN1A, CDKN1B o ciclina A.
• Localizzata esclusivamente nel nucleo, RPRD1B è una fosfoproteina e una proteina acetilata, secondo quanto rilevato dalle identificazioni proteomiche.
• È espressa preferenzialmente in diversi tessuti tumorali (colon, polmone, fegato, mammella, prostata, stomaco, endometrio uterino e tumori cervicali), con livelli superiori rispetto ai tessuti non tumorali adiacenti, suggerendo un ruolo nella proliferazione e nell'oncogenesi.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 80–326 di RPRD1B umano; l'anticorpo policlonale può riconoscere più epitopi all'interno di questa regione. Come controlli positivi, si consiglia di utilizzare una proteina ricombinante a lunghezza intera o lisati di linee cellulari umane, murine o di ratto.
• Nel Western blotting è prevista una banda intorno a 37 kDa. Validare la specificità con condizioni appropriate di blocco e rilevazione e includere marcatori di peso molecolare.
• Per IHC-P può essere necessario il recupero antigenico. Testare su tessuti tumorali noti per la sovraespressione di RPRD1B (ad esempio tumore del colon o della mammella) e includere un controllo negativo per confermare la specificità della colorazione.
• Questo anticorpo può essere utilizzato nell'ELISA; per i formati di cattura/rilevazione, l'abbinamento con un anticorpo monoclonale ad alta affinità può migliorare la sensibilità.

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