Anticorpo policlonale anti-RPS27A per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P62979

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di RPS27A

• RPS27A codifica una fusione proteina ribosomica-ubiquitina che viene elaborata post-traduzionalmente per produrre ubiquitina libera e la proteina ribosomica eS31 (nota anche come S27A), entrambe essenziali per l'omeostasi cellulare.
• La parte ubiquitinica di questo precursore partecipa a diversi processi dipendenti dall'ubiquitina, inclusa la degradazione proteica tramite catene poliubiquitiniche legate a Lys-48 che indirizzano i substrati al proteasoma, nonché a funzioni non proteolitiche come la riparazione del DNA (legata a Lys-6), l'endocitosi e la segnalazione NF-kappa-B (legata a Lys-63), e la regolazione del ciclo cellulare (legata a Lys-11 e Lys-29).
• La proteina ribosomica eS31 è un componente integrale della subunità ribosomica piccola 40S e contribuisce all'assemblaggio del processoma della subunità piccola (SSU) nel nucleolo, dove aiuta nel ripiegamento, nella modifica e nel clivaggio del pre-rRNA durante la biogenesi dei ribosomi. Riferimenti correlati: PMID:23636399 PMID:9582194 PMID:34516797
• La proteina si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo, con arricchimento nel nucleolo, coerente con il suo duplice ruolo nella segnalazione dell'ubiquitina e nella produzione dei ribosomi.
• Le modifiche post-traduzionali della proteina di fusione includono acetilazione, ADP-ribosilazione e fosforilazione, che possono regolare la sua elaborazione, stabilità o interazioni.
• RPS27A contiene un dominio a dito di zinco e motivi di legame metallico, suggerendo ruoli strutturali nell'assemblaggio ribosomiale o nelle funzioni correlate all'ubiquitina.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre l'intera proteina di fusione (amminoacidi 1–156); l'anticorpo policlonale risultante può riconoscere epitopi all'interno dell'ubiquitina, dell'eS31 o di entrambi. Nel Western blot, considerare che potrebbero apparire bande corrispondenti alla fusione non clivata (~18 kDa), all'ubiquitina libera (~8,5 kDa) e all'eS31 (~15 kDa) a seconda dello stato di elaborazione dell'ubiquitina nel campione e degli epitopi riconosciuti.
• Per IHC-P e IF/ICC, il modello di colorazione subcellulare previsto include segnali citoplasmatici, nucleari e nucleolari. Validare la localizzazione mediante colorazione simultanea con marcatori per questi compartimenti.
• Nelle applicazioni ELISA, utilizzare RPS27A ricombinante a lunghezza intera o ubiquitina/eS31 purificati come antigeni di rivestimento per valutare la specificità e il titolo dell'anticorpo.
• È prevista la reattività crociata con topo e ratto; tuttavia, verificare sempre le prestazioni nel vostro specifico modello sperimentale con appropriati controlli positivi e negativi.

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