Anticorpo Policlonale Anti-RPS27A per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P62979

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RPS27A

• RPS27A codifica per una proteina di fusione ubiquitina-proteina ribosomiale che viene processata post-traduzionalmente per produrre ubiquitina libera e la proteina ribosomiale eS31 (anche nota come S27A), entrambe con ruoli essenziali nell'omeostasi cellulare.
• La porzione di ubiquitina di questo precursore partecipa a vari processi dipendenti dall'ubiquitina, inclusa la degradazione proteica tramite catene di poliubiquitina legate a Lys-48 che indirizzano i substrati al proteasoma, così come funzioni non proteolitiche come la riparazione del DNA (legate a Lys-6), l'endocitosi e la segnalazione di NF-kappa-B (legate a Lys-63), e la regolazione del ciclo cellulare (legate a Lys-11 e Lys-29).
• La proteina ribosomiale eS31 è un componente integrante della subunità ribosomiale piccola 40S e contribuisce all'assemblaggio del processoma della subunità piccola (SSU) nel nucleolo, dove aiuta nel ripiegamento, nella modifica e nel taglio del pre-rRNA durante la biogenesi del ribosoma. Riferimenti correlati: PMID:23636399 PMID:9582194 PMID:34516797
• La proteina si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo, con un arricchimento nel nucleolo, coerente con i suoi duplici ruoli nella segnalazione dell'ubiquitina e nella produzione del ribosoma.
• Le modifiche post-traduzionali della proteina di fusione includono acetilazione, ADP-ribosilazione e fosforilazione, che possono regolarne il processamento, la stabilità o le interazioni.
• RPS27A contiene un dominio zinc-finger e motivi leganti metalli, suggerendo ruoli strutturali nell'assemblaggio ribosomiale o in funzioni correlate all'ubiquitina.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre l'intera proteina di fusione (amminoacidi 1–156); l'anticorpo policlonale risultante può riconoscere epitopi all'interno dell'ubiquitina, di eS31, o di entrambe. Nel Western blot, considerare che potrebbero apparire bande corrispondenti alla fusione non tagliata (~18 kDa), all'ubiquitina libera (~8.5 kDa) e a eS31 (~15 kDa) a seconda dello stato di processamento dell'ubiquitina nel campione e degli epitopi riconosciuti.
• Per IHC-P e IF/ICC, il pattern di colorazione subcellulare atteso include segnali citoplasmatici, nucleari e nucleolari. Validare la localizzazione mediante colorazione co-marcatori per questi compartimenti.
• Nelle applicazioni ELISA, utilizzare RPS27A ricombinante a lunghezza intera o ubiquitina/eS31 purificata come antigeni di rivestimento per valutare la specificità e il titolo dell'anticorpo.
• È attesa una reattività incrociata con topo e ratto; tuttavia, verificare sempre le prestazioni nel vostro specifico sistema modello con appropriati controlli positivi e negativi.

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