Anti-RSK2 / RPS6KA3 Anticorpo Monoclonale Coniglio per WB, IHC-P, ELISA - P51812

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RSK2

• RSK2 (Ribosomal protein S6 kinase alpha-3), noto anche come RPS6KA3, p90RSK3, MAPKAPK1B e ISPK-1, è una chinasi proteina serina/treonina codificata dal gene RPS6KA3 sul cromosoma X umano. Appartiene alla famiglia delle chinasi AGC e contiene due domini chinasi collegati da una regione linker.
• Agendo a valle della cascata di segnalazione ERK/MAPK, RSK2 fosforila direttamente il fattore di trascrizione CREB1 e l'istona H3 in Ser-10 dopo stimolazione con EGF, innescando l'espressione genica immediata precoce (PubMed:10436156, 9770464).
  Riferimenti correlati: PMID:10436156 PMID:9770464
• RSK2 promuove la sopravvivenza cellulare fosforilando e inattivando i fattori pro-apoptotici BAD e DAPK1, sopprimendo così le loro funzioni apoptotiche (PubMed:16213824).
  Riferimenti correlati: PMID:16213824
• Attraverso la fosforilazione della proteina ribosomica S6 (RPS6) e del fattore di inizio della traduzione EIF4B, RSK2 potenzia la traduzione dipendente dal cappuccio in risposta all'insulina e ai mitogeni (PubMed:17360704, 18508509, 18813292).
  Riferimenti correlati: PMID:17360704 PMID:18508509 PMID:18813292
• RSK2 integra i segnali nutrizionali e di crescita fosforilando TSC2 e RPTOR, regolatori chiave di mTORC1, modulando così la segnalazione mTOR indipendentemente dalla via PI3K/AKT (PubMed:18722121).
  Riferimenti correlati: PMID:18722121
• Localizzato sia nel nucleo che nel citoplasma, RSK2 è espresso in molti tessuti, con i livelli più alti trovati nel muscolo scheletrico.
• Le mutazioni in RPS6KA3 sono associate alla sindrome di Coffin-Lowry (CLS), una disabilità intellettiva legata all'X caratterizzata da ritardo psicomotorio e anomalie scheletriche.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli aminoacidi 600-700 di RSK2 umano, una regione conservata tra uomo, topo e ratto, che supporta la reattività incrociata osservata. Per il Western blot, è prevista una banda a circa 84 kDa; considerare l'uso di campioni ridotti e il caricamento di 20-30 µg di lisato cellulare. Validare la specificità della banda utilizzando controlli positivi appropriati (es. cellule HeLa, A431 o NIH/3T3) e controlli negativi (es. lisati con knockout di RSK2 o campioni trattati con siRNA).
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), si raccomanda il recupero dell'antigene mediato dal calore con tampone citrato (pH 6.0). Titolare l'anticorpo primario partendo da una diluizione di 1:50-1:200 e ottimizzare il rilevamento con un sistema HRP basato su polimeri. Includere sempre controlli di isotipo e sezioni di tessuto note per esprimere RSK2.
• Nelle applicazioni ELISA, considerare il rivestimento con proteina RSK2 ricombinante o peptide e utilizzare un protocollo ELISA indiretto standard. La concentrazione di lavoro ottimale dell'anticorpo deve essere determinata empiricamente mediante titolazione a scacchiera.

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