Anticorpo Policlonale Anti-RTF1 di Coniglio per WB, ELISA - Q92541

Specifiche e Parametri Nucleari del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RTF1

• RTF1 (omologo della proteina associata all'RNA polimerasi RTF1), noto anche come GTL7 e KIAA0252, è un componente centrale del complesso PAF1 (PAF1C) che regola l'allungamento della trascrizione dell'RNA polimerasi II e la modificazione della cromatina.
• PAF1C si associa all'RNA polimerasi II attraverso l'interazione con il dominio C-terminale (CTD) di POLR2A sia in forma non fosforilata che fosforilata (Ser-2 e Ser-5), agendo in modo indipendente e sinergico con fattori di allungamento come TCEA1.
• Il complesso è essenziale per la trascrizione di geni dello sviluppo, inclusi i geni bersaglio di Hox e Wnt, e svolge un ruolo nell'ematopoiesi e nella leucemogenesi attraverso l'associazione con oncoproteine riarrangiate KMT2A/MLL1.
• RTF1 è localizzato nel nucleoplasma all'interno del nucleo, in linea con il suo ruolo nella regolazione della trascrizione.
• PAF1C è coinvolto nelle modificazioni degli istoni: recluta la ligasi E3 ubiquitina RNF20/40 e gli enzimi E2 UBE2A/B per catalizzare la monoubiquitinazione dell'istone H2B alla Lis-120 (H2BK120ub1) ed è necessario per la trimetilazione dell'istone H3 alla Lis-4 (H3K4me3) sui geni della pluripotenza delle cellule staminali.
• La proteina contiene un dominio coiled-coil, lega il DNA a singolo filamento ed è regolata dalla fosforilazione.
• Durante l'infezione da influenza A H3N2, PAF1C interagisce con la proteina virale NS1 per modulare la trascrizione genica dell'ospite.
• RTF1 è necessario per l'induzione massima dei geni da shock termico.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno era un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 300-400 di RTF1 umano; considerare l'uso di questa regione per verificare la specificità dell'anticorpo attraverso esperimenti di blocco del peptide.
• Per il Western blot, RTF1 umano ha un peso molecolare previsto di ~80 kDa; convalidare con appropriati controlli positivi e negativi (ad es., lisati di cellule umane e murine) poiché è riportata reattività crociata con il topo.
• L'anticorpo è adatto per ELISA; ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevamento in base alla localizzazione nucleoplasmica del bersaglio.
• RTF1 è una fosfoproteina; tenere presente che le modificazioni post-traduzionali potrebbero influenzare il rilevamento in alcune preparazioni di campioni; considerare l'uso di inibitori delle fosfatasi nei buffer di lisi se necessario.
• Per un segnale arricchito, gli estratti nucleari possono essere vantaggiosi a causa della localizzazione nucleare di RTF1.

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