Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-RUNX2 per WB, IP, ELISA - Q13950

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RUNX2

• Il fattore di trascrizione Runt-related 2 (RUNX2), noto anche come proteina 3 della leucemia mieloide acuta (AML3), subunità alfa-1 del fattore di legame core (CBFA1) e fattore di trascrizione specifico degli osteoblasti 2 (OSF2), è un fattore di trascrizione che lega il DNA.
• RUNX2 è un regolatore principale della differenziazione osteoblastica e della morfogenesi scheletrica, essenziale per la maturazione degli osteoblasti e per l'ossificazione intramembranosa ed endocondrale. Riferimenti correlati: PMID:28505335, PMID:28703881, PMID:28738062
• Si lega alla sequenza consenso core 5'-PYGPYGGT-3' nei enhancer e nei promotori di geni critici per l'osteogenesi e l'ematopoiesi, inclusa osteocalcina, osteopontina, sialoproteina ossea, collagene alfa 1(I), LCK, IL-3 e GM-CSF.
• Negli osteoblasti, RUNX2 agisce in sinergia con SPEN/MINT per potenziare l'attivazione mediata da FGFR2 dell'elemento responsivo al FGF dell'osteocalcina (OCFRE) e inibisce l'attivazione trascrizionale dipendente da KAT6B.
• A livello subcellulare, RUNX2 si localizza sia nel nucleo che nel citoplasma.
• La sua espressione è altamente specifica per gli osteoblasti, riflettendo il suo ruolo fondamentale nella formazione ossea.
• RUNX2 subisce multiple modificazioni post-traduzionali, inclusa fosforilazione, metilazione e ubiquitinazione, che regolano la sua attività e stabilità, ed è associato a varianti patologiche legate a displasie scheletriche.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 336–439 all'interno della regione C-terminale di RUNX2 umano; il riconoscimento dell'epitopo può essere influenzato da modificazioni post-traduzionali o dal contesto conformazionale in questo dominio.
• Per il Western blot, utilizzare lisati cellulari totali da linee cellulari simili a osteoblasti (es. Saos‑2, MG‑63) o colture differenziate in osteoclasti, e prevedere una banda predominante vicino a 57 kDa; validare con appropriati controlli di carico.
• Nell'immunoprecipitazione, titolare la quantità di anticorpo rispetto a una quantità fissa di lisato e ottimizzare le condizioni del tampone di lisi (es. RIPA con inibitori di proteasi/fosfatasi) per preservare le interazioni proteiche.
• Per l'ELISA, considerare l'utilizzo di un frammento ricombinante di RUNX2 che copre la sequenza immunogenica come standard; verificare la reattività incrociata con campioni di mouse se applicato a modelli di malattia roditori.
• La reattività incrociata con il mouse consente studi comparativi in colture di osteoblasti murini o modelli ossei transgenici, ma verificare sempre le prestazioni nel tessuto specifico o nel tipo cellulare di interesse.

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