Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-S100P per WB, IF/ICC ed ELISA - P25815

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della S100P

• S100P è un membro della famiglia di proteine leganti il calcio S100 con motivi EF-hand, nota anche come MIG9 (proteina 9 induttrice della migrazione) e S100E.
• Funziona come sensore del calcio, modulando la segnalazione cellulare del calcio interagendo con effettori a valle come EZR (ezrina) e PPP5C (serina/treonina-fosfatasi proteica 5).
• Gioca un ruolo nella formazione dei microvilli delle cellule epiteliali e può regolare la dinamica del citoscheletro alla corteccia cellulare.
• Stimola la proliferazione cellulare in modo autocrino tramite l'attivazione del recettore per i prodotti finali della glicazione avanzata (RAGE), potenzialmente contribuendo alla crescita tumorale.
• Si localizza nel nucleo, nel citoplasma e nelle proiezioni cellulari, incluse le membrane dei microvilli, riflettendo i suoi ruoli di segnalazione dinamici.
• Distribuzione tissutale: ampiamente espressa, con livelli più elevati nella placenta, cuore, polmone, muscolo scheletrico, milza e leucociti; notevolmente up-regolata negli adenocarcinomi duttali pancreatici e nelle neoplasie intraepiteliali pancreatiche.
• I nomi alternativi (MIG9, S100E) suggeriscono il coinvolgimento nella migrazione cellulare e nella biologia epiteliale.
• Il peso molecolare teorico è di circa 10,4 kDa, coerente con la banda di ~10 kDa osservata nel Western blot.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è una proteina di fusione ricombinante che copre gli aminoacidi 1-95, comprendendo i domini EF-hand N-terminali. Il legame dell'anticorpo può essere sensibile ai cambiamenti conformazionali indotti dal calcio; considerare l'esecuzione di esperimenti in presenza e assenza di calcio per valutare l'accessibilità dell'epitopo.
• Per il Western blot, prevedere una banda vicino a 10 kDa. Utilizzare un intervallo di marcatori a basso peso molecolare e considerare un gel SDS-PAGE al 15% o a gradiente per una risoluzione ottimale delle piccole proteine.
• Per IF/ICC, S100P si localizza sia nel nucleo che nel citoplasma, con arricchimento nelle proiezioni della membrana. Validare in modelli di linee cellulari pertinenti come le cellule del cancro al pancreas (es. PANC-1, BxPC-3) dove l'espressione è elevata.
• Per ELISA, utilizzare S100P umana ricombinante come controllo positivo. Assicurarsi che il tampone di rivestimento e le condizioni di lavaggio siano compatibili con la stabilità della proteina legante il calcio.
• Includere appropriati controlli negativi (es. lisati tissutali da cervello o testicolo, dove S100P è bassa o assente) per confermare la specificità.

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