Anticorpo policlonale coniglio Anti-SAE1 per WB, ELISA - Q9UBE0

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di SAE1

• SAE1 (subunità 1 dell'enzima SUMO-activante), nota anche come AOS1, SUA1, UBLE1A o HSPC140, è codificata dal gene SAE1 (ID genico: 10055).
• Forma un eterodimero con UBA2 (SAE2) che funge da enzima attivatore E1 per SUMO1, SUMO2, SUMO3 e probabilmente SUMO4, avviando la cascata di SUMoilazione.
• L'eterodimero catalizza l'attivazione dipendente da ATP delle proteine SUMO, formando un legame tioestere tra la glicina C-terminale di SUMO e una cisteina conservata su UBA2/SAE2, preparando SUMO per il trasferimento agli enzimi coniuganti E2.
• SAE1 localizza prevalentemente nel nucleo, in coerenza con il suo ruolo nella regolazione di processi nucleari come la trascrizione, la riparazione del DNA e la segregazione cromosomica tramite SUMoilazione.
• Le modifiche post-traduzionali di SAE1 includono acetilazione e fosforilazione, che possono modolarne l'attività, la stabilità o l'interazione con UBA2 e i substrati SUMO.
• L'espressione proteica di SAE1 aumenta durante la fase S e diminuisce nella fase G2, suggerendo una regolazione dipendente dal ciclo cellulare del macchinario di SUMoilazione.
• L'enzima attivatore di SUMO è essenziale per la coniugazione globale di SUMO, una via implicata nelle risposte cellulari allo stress, nella dinamica nucleare e in stati patologici tra cui il cancro e le malattie neurodegenerative.
• L'impianto alternativo dello splicing di SAE1 produce multiple isoforme, che possono contribuire alla diversità funzionale nella regolazione della via SUMO.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno copre i 346 amminoacidi N-terminali della SAE1 umana; pertanto, questo anticorpo può rilevare sia la proteina full-length che i frammenti N-terminali. Considerare la posizione dell'epitopo quando si analizzano mutanti di troncamento.
• Per Western blot, è attesa una banda predominante vicino a 38 kDa in lisati umani e murini. Validare la specificità della banda utilizzando controlli positivi e negativi appropriati per il vostro sistema di campioni.
• Per ELISA, la SAE1 ricombinante o i lisati cellulari possono essere utilizzati come antigene di rivestimento; ottimizzare empiricamente la diluizione dell'anticorpo e le condizioni di rilevazione.
• La reattività crociata con la SAE1 murina suggerisce un'utilità nei modelli murini; confermare le prestazioni nel tessuto o tipo cellulare previsto prima di esperimenti su larga scala.

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