Anticorpo monoclonale anti-SAMHD1 per WB, IHC-P, ELISA - Q9Y3Z3

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di SAMHD1

• SAMHD1 (proteina 1 contenente i domini SAM e HD) è conosciuta anche come DCIP, CHBL2, HDDC1, MOP-5, SBBI88 e hSAMHD1. È una deossinucleoside trifosfato trifosfoidrolasi con ruoli chiave nella restrizione antivirale e nella riparazione del DNA.
• SAMHD1 agisce come fattore di restrizione dell'ospite riducendo le riserve cellulari di dNTP tramite la propria attività dNTPasica, bloccando così la trascrizione inversa di retrovirus come HIV-1 nelle cellule dendritiche e mieloidi (PubMed:19525956, PubMed:21613998, PubMed:21720370). Riferimenti correlati: PMID:19525956 PMID:21613998 PMID:21720370
• Oltre ai retrovirus, SAMHD1 limita i retrotrasposoni LINE-1, collegandola al mantenimento della stabilità del genoma (PubMed:24035396, PubMed:24217394, PubMed:29610582). Riferimenti correlati: PMID:24035396 PMID:24217394 PMID:29610582
• La fosforilazione in Thr-592 agisce come un interruttore molecolare: inibisce l'attività dNTPasica e la funzione antivirale, promuovendo al contempo la resezione delle estremità del DNA in corrispondenza delle forcelle di replicazione bloccate tramite l'attivazione di MRE11 (PubMed:23601106, PubMed:23602554, PubMed:29670289). Riferimenti correlati: PMID:23601106 PMID:23602554 PMID:29670289
• SAMHD1 si localizza prevalentemente nel nucleo e si associa ai cromosomi, in linea con il suo ruolo nella riparazione del DNA e nell'elaborazione delle forcelle di replicazione.
• È ampiamente espressa nei tessuti, tra cui cuore, muscolo scheletrico, milza, fegato, intestino tenue, placenta, polmone e leucociti del sangue periferico, ma è assente nel cervello e nel timo (PubMed:11064105). Riferimenti correlati: PMID:11064105
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e formazione di legami isopeptidici; le mutazioni in SAMHD1 sono associate alla sindrome di Aicardi-Goutières, un'interferonopatia di tipo I.
• SAMHD1 aumenta inoltre l'ipermutazione delle immunoglobuline nei linfociti B promuovendo mutazioni di transversione (per similitudine).

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 527-626 della SAMHD1 umana, una regione contenente il sito di fosforilazione regolatorio Thr-592. Gli utenti dovrebbero considerare lo stato di fosforilazione di SAMHD1 nel proprio sistema sperimentale, poiché può influenzare il legame dell'anticorpo; si raccomanda la validazione nei tipi cellulari pertinenti o in presenza di stimoli specifici.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di 72 kDa. Utilizzare condizioni denaturanti appropriate e includere controlli positivi (ad esempio, lisati di THP-1, HeLa o milza) per confermare la specificità della banda.
• Per l'immunoistochimica su paraffina (IHC-P), è probabilmente necessario il recupero antigenico (mediato dal calore o enzimatico). Testare su tessuti noti per esprimere SAMHD1 (ad esempio, milza e fegato) e includere controlli isotipici.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; si raccomandano un corretto abbinamento e l'ottimizzazione della concentrazione. Eseguire una convalida incrociata con la fonte dell'antigene prevista.
• Considerati i ruoli di SAMHD1 nella difesa antivirale e nella risposta al danno del DNA, i ricercatori possono valutarne l'espressione in seguito a stimolazione con interferone o a stress replicativo.

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