Anticorpo policlonale di coniglio anti-SARS-CoV-2 NSP16 per WB, ELISA - P0DTD1

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di NSP16

• NSP16 è il dominio 2'-O-metiltransferasi della poliproteina replicasi 1ab di SARS-CoV-2, responsabile della metilazione della struttura cap 5' degli mRNA virali. Riferimenti correlati: PMID:35944563
• L'attività di metilazione è fondamentale per l'evasione immunitaria, consentendo agli mRNA virali di evitare il riconoscimento da parte dei fattori di restrizione dell'ospite IFIT1 e IFIT3. Riferimenti correlati: PMID:35944563 PMID:36722972 PMID:36285486
• NSP16 richiede un cap di guanosina N7-metilata sul substrato mRNA per il legame e l'attività enzimatica. Riferimenti correlati: PMID:35944563
• Può inoltre interferire con lo splicing degli mRNA dell'ospite interagendo con i domini di riconoscimento del pre-mRNA degli snRNA U1 e U2 nel nucleo. Riferimenti correlati: PMID:33080218
• La localizzazione subcellulare comprende il citoplasma dell'ospite, la regione perinucleare e il nucleo, in linea con i suoi ruoli nella replicazione virale e nella manipolazione dell'ospite.
• In quanto parte del complesso virale di replicazione-trascrizione, NSP16 è essenziale per la produzione di mRNA virali maturi e competenti per la traduzione.
• La poliproteina viene processata dalle proteasi virali in 16 proteine non strutturali; NSP16 costituisce il dominio C-terminale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 236–290 di NSP16, una regione che può essere esposta in condizioni denaturanti, supportandone l'uso nel Western blot.
• Validare l'anticorpo in lisati cellulari infettati da SARS-CoV-2 o con la proteina NSP16 ricombinante per confermarne la specificità.
• Per l'ELISA, valutare l'abbinamento con un anticorpo di cattura o di rilevazione appropriato; eseguire una titolazione per ottimizzare i rapporti segnale/rumore.
• Poiché il peso molecolare previsto di NSP16 è di circa 33 kDa, confermare la dimensione della banda osservata nelle condizioni sperimentali, tenendo conto di possibili modifiche post-traduzionali o intermedi di processamento.
• Includere controlli positivi e negativi appropriati per distinguere il segnale specifico dal fondo.

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