Anticorpo policlonale coniglio anti-SARS-CoV-2 NSP2 per WB e ELISA - P0DTD1

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della NSP2 di SARS-CoV-2

• La NSP2 è una proteina non strutturale scissa dalla poliproteina replicasi 1ab (ORF1ab) di SARS-CoV-2, un precursore multifunzionale di grandi dimensioni coinvolto nella trascrizione e replicazione virale.
• La NSP2 potenzia la repressione dell'mRNA dell'ospite da parte del complesso 4EHP-GYF2, inibendo così le risposte antivirali e facilitando la replicazione virale. Questa attività avviene in cooperazione con NSP1, che induce l'arresto dei ribosomi sulle trascrizioni dell'ospite.
• La NSP2 si localizza principalmente nel citoplasma dell'ospite ed è associata a complessi di replicazione virale che si formano su vescicole a doppia membrana derivate dal reticolo endoplasmatico.
• A differenza di molte altre proteine non strutturali, la NSP2 non possiede domini enzimatici noti; il suo ruolo nell'antagonismo immunitario dell'ospite sembra basarsi su interazioni proteina-proteina, in particolare attraverso la modulazione della via 4EHP-GYF2.
• La poliproteina genera anche altri enzimi critici: la proteasi simile alla papaina (nsp3) che scinde la NSP2 dal precursore, la proteasi principale (nsp5) e la RNA-polimerasi RNA-dipendente (nsp12).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo è stato prodotto contro un peptide sintetico che copre i residui 150-250 della NSP2. Nel Western blot, si prevede che la proteina NSP2 matura migri a ~71 kDa; tuttavia, la poliproteina replicasi a lunghezza intera (794 kDa) potrebbe essere visibile se la lavorazione è incompleta. Convalidare la/e banda/e rilevata/e utilizzando controlli appropriati (es. lisati di cellule infette da SARS-CoV-2 vs. finto).
• Per l'ELISA, considerare il rivestimento con la proteina ricombinante NSP2 o il lisato virale. Eseguire esperimenti di titolazione per determinare le diluizioni di lavoro ottimali.
• La reattività crociata è confermata contro SARS-CoV-2; si consiglia di testare contro altri coronavirus o omologhi NSP2 correlati per la valutazione degli effetti off-target.

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