Anticorpo policlonale Anti-SARS-CoV-2 NSP3 per WB, ELISA - P0DTD1

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NSP3 di SARS-CoV-2

• NSP3 di SARS-CoV-2 è un componente della poliproteina replicasi 1ab (nota anche come poliproteina ORF1ab), che viene clivata dall'attività proteasi papaina-simile endogena per rilasciare la proteina NSP3.
• NSP3 possiede attività proteasi papaina-simile (PL-PRO) responsabile del clivaggio all'estremità N-terminale della poliproteina e collabora con NSP4 per assemblare le vesciche a doppia membrana (DMV) necessarie per la replicazione virale (PubMed:35551511). Riferimenti correlati: PMID:35551511
• Contrasta l'induzione innata dell'interferone di tipo I bloccando la fosforilazione, la dimerizzazione e la traslocazione nucleare della proteina ospite IRF3 (PubMed:32733001) e inibisce la segnalazione di NF-kappa-B (per similarità). Riferimenti correlati: PMID:32733001
• NSP3 agisce come enzima deubiquitinante e deISGilante, processando entrambe le catene di poliubiquitina legate a Lisina-48 e Lisina-63 e rimuovendo preferenzialmente ISG15 da IFIH1/MDA5 (PubMed:32726803, PubMed:33727702). Riferimenti correlati: PMID:32726803, PMID:33727702
• La proteina possiede attività ADP-ribosio idrolasi, rimuovendo il mono-ADP-ribosio dalle proteine ospite, probabilmente interferendo con le difese immunitarie ospite mediate da PARP (probabile) (PubMed:37242344). Riferimenti correlati: PMID:37242344
• La localizzazione subcellulare comprende il citoplasma ospite, la membrana del reticolo endoplasmatico e le vesciche a doppia membrana, in linea con il suo ruolo nella formazione degli organelli di replicazione.
• Le parole chiave includono immunoevasione virale, inibizione della risposta immunitaria innata ospite e attività deubiquitinasi, che evidenziano il suo ruolo multifunzionale nell'interazione tra ospite e virus.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1-200 di NSP3 (YP_009725299.1), una regione nel dominio N-terminale; questo permette di catturare epitopi critici per le sue funzioni di proteasi o di legame all'ADP-ribosio.
• Per Western blot (WB), si consiglia di utilizzare lisati di cellule intere infettate da SARS-CoV-2, ma è necessario convalidare la banda attesa (circa 794 kDa per la poliproteina intera o il frammento NSP3 clivato) nel proprio sistema specifico.
• Nelle applicazioni ELISA, questo anticorpo policlonale può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; l'abbinamento con un anticorpo monoclonale può migliorare la specificità.
• La reattività crociata con SARS-CoV-2 è stata confermata; se necessario, si raccomanda di eseguire test con altri coronavirus.

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