Anticorpo policlonale di coniglio anti-SARS-CoV-2 NSP4 per WB, IP, ELISA - P0DTD1

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di NSP4

• La proteina non strutturale 4 (NSP4) di SARS-CoV-2 è un componente della poliproteina replicasi 1ab (pp1ab) codificata dal gene ORF1ab.
• NSP4 è essenziale per la formazione di vescicole a doppia membrana (DMV), gli organelli di replicazione virale, in collaborazione con NSP3.
  Riferimenti correlati: PMID:35551511
• Le DMV forniscono un microambiente protettivo per la sintesi dell'RNA virale, proteggendolo dai sensori dell'immunità innata dell'ospite.
• NSP4 si localizza sulla membrana del reticolo endoplasmatico (RE) dell'ospite, dove induce curvatura di membrana e vescicolazione.
• È una proteina transmembrana multi-domino, che si integra nella membrana del RE attraverso diverse regioni idrofobiche.
• La funzione di NSP4 è conservata tra i coronavirus, ciò evidenzia la sua importanza nel ciclo di replicazione virale.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno comprende la regione C-terminale (aa 400–500) di NSP4, prevista essere sul lato citoplasmatico della membrana del RE; questo progetto può facilitare la rilevazione sia della proteina denaturata che nativa in applicazioni come WB e IP.
• Per Western blot, tenere presente che la proteina NSP4 matura migra a circa 56 kDa, mentre la poliproteina pp1ab full-length è ~794 kDa; ottimizzare di conseguenza la percentuale di gel e le condizioni di trasferimento.
• In ELISA, considerare di rivestire con proteina NSP4 ricombinante o abbinare questo anticorpo a un anticorpo di rilevazione adatto per saggi sandwich; si consiglia la validazione in lisati cellulari infettati da SARS-CoV-2.
• Poiché l'anticorpo ha reattività crociata con SARS-CoV-2, è adatto per studiare questo specifico coronavirus; testare la reattività crociata con altri coronavirus se sono necessarie applicazioni più ampie.

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