Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-SARS-CoV-2 NSP7 per WB, ELISA - P0DTC2

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Glicoproteina Spike (S)

• La glicoproteina Spike (S), nota anche come proteina E2 o peplomero, è codificata dal gene S di SARS-CoV-2 e media l'ingresso virale nelle cellule ospiti.
• La proteina S attacca il virione alla membrana cellulare ospite interagendo principalmente con il recettore ACE2 (PubMed:32142651, PubMed:32155444, PubMed:33607086). Riferimenti correlati: PMID:32142651 PMID:32155444 PMID:33607086
• L'ingresso virale può procedere anche tramite recettori alternativi, inclusi NRP1/NRP2 (PubMed:33082294, PubMed:33082293) e integrine (PubMed:35150743), che possono contribuire al tropismo per le cellule epiteliali olfattive. Riferimenti correlati: PMID:33082294 PMID:33082293 PMID:35150743
• Dopo il legame al recettore, la proteina S subisce una scissione proteolitica da parte di TMPRSS2 dell'ospite o catepsina L per innescare la fusione di membrana, agendo come una proteina di fusione virale di classe I (PubMed:32142651, PubMed:32703818, PubMed:34159616, PubMed:34561887). Riferimenti correlati: PMID:32142651 PMID:32703818 PMID:34159616 PMID:34561887
• Il precursore della spike viene processato nelle subunità S1 e S2; la subunità S2 contiene peptidi di fusione e ripetizioni eptadiche che si ripiegano per guidare la fusione tra l'involucro virale e la membrana ospite.
• Subcellularmente, la proteina spike si localizza sulla membrana del virione, nel compartimento intermedio reticolo endoplasmatico–Golgi dell'ospite e sulla membrana cellulare dell'ospite.
• Il dominio del gambo di S contiene tre cerniere flessibili, che conferiscono alla testa di legame del recettore una notevole libertà orientazionale (PubMed:32817270). Riferimenti correlati: PMID:32817270

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un frammento proteico ricombinante di NSP7; per il Western blot, considerare di validare il rilevamento della NSP7 endogena in lisati di cellule infettate da SARS-CoV-2 o utilizzare la NSP7 ricombinante come controllo positivo.
• Essendo un anticorpo policlonale, può verificarsi una variazione da lotto a lotto; includere controlli negativi appropriati e ottimizzare i fattori di diluizione per ogni nuovo lotto.
• Per l'ELISA, l'abbinamento con un anticorpo di rilevamento NSP7 validato o con l'antigene può migliorare la sensibilità del saggio; eseguire titolazioni a scacchiera per determinare le concentrazioni ottimali.
• Si noti che il peso molecolare previsto per NSP7 è di circa 9,6 kDa; se si osservano bande inaspettate, valutare la preparazione del campione e la specificità dell'anticorpo.

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