Anticorpo policlonale Anti-SARS-CoV-2 Spike ECD per WB, ELISA - P0DTC2

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della glicoproteina Spike di SARS-CoV-2

• La glicoproteina spike (S, E2, peplomerina) è una proteina virale di fusione di classe I che media l'ingresso di SARS-CoV-2 nelle cellule ospiti legandosi al recettore ACE2 (PubMed:32142651, PubMed:32155444, PubMed:33607086). Riferimenti correlati: PMID:32142651 PMID:32155444 PMID:33607086
• Dopo il legame con il recettore, la scissione nel sito S2/S2' da parte delle proteasi ospiti TMPRSS2 o catepsina L (CSTL) innesca la fusione delle membrane, sia sulla superficie cellulare sia all'interno degli endosomi (PubMed:32142651, PubMed:32703818, PubMed:34159616). Riferimenti correlati: PMID:32142651 PMID:32703818 PMID:34159616
• La proteina spike può anche utilizzare recettori alternativi come NRP1/NRP2 e le integrine, contribuendo al tropismo per le cellule epiteliali olfattive e alle vie di ingresso indipendenti dall'ACE2 (PubMed:33082293, PubMed:33082294, PubMed:35150743). Riferimenti correlati: PMID:33082293 PMID:33082294 PMID:35150743
• L'ectodominio della proteina spike (ECD) comprende la subunità legante il recettore S1 e la subunità di fusione S2, con cerniere flessibili nello stalk che permettono un orientamento dinamico (PubMed:32817270). Riferimenti correlati: PMID:32817270
• Subcellularmente, la proteina spike si trova sulla membrana del virione, sulla membrana del compartimento intermedio tra reticolo endoplasmatico e apparato di Golgi della cellula ospite e sulla membrana della cellula ospite.
• La proteina è ampiamente glicosilata e palmitoilata, presenta legami disolfuro e regioni a spirale avvolte caratteristiche del meccanismo di fusione virale.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno era una proteina di fusione ricombinante che copre l'intero dominio extracellulare (amminoacidi 11–1208), pertanto l'anticorpo è adatto per rilevare forme full-length e solubili dell'ECD di spike.
• Per il Western blot in condizioni riducenti, si consiglia di utilizzare un tampone per campioni denaturante con β-mercaptoetanolo o DTT, poiché la proteina spike contiene molteplici legami disolfuro.
• Questo anticorpo è convalidato per ELISA, potenzialmente adatto per la cattura dell'antigene spike o saggi di legame; si raccomanda di ottimizzare le condizioni di rivestimento e blocco.

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