Anticorpo Policlonale Anti-SARS-CoV-2 Spike RBD per WB, IF/ICC, IP, ELISA - P0DTC2

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Glicoproteina Spike

• La glicoproteina spike (S) è una proteina di fusione precursore che media l'ingresso virale legandosi al recettore ospite ACE2 e innescando la fusione di membrana. Riferimenti correlati: PMID:32142651, PMID:32155444, PMID:33607086
• Dopo il taglio, la subunità S2 espone peptidi di fusione per la fusione diretta della membrana cellulare; in alternativa, la S non clivata porta all'endocitosi e alla fusione tramite vie endosomiali. Riferimenti correlati: PMID:34561887, PMID:32075877, PMID:32221306
• Recettori ospiti alternativi includono NRP1/NRP2, integrine e ASGR1, consentendo un ingresso indipendente da ACE2 e contribuendo al tropismo tissutale. Riferimenti correlati: PMID:33082294, PMID:33082293, PMID:35150743, PMID:34837059
• La proteina S viene clivata dalle proteasi ospiti TMPRSS2 o catepsina L (CSTL) durante l'ingresso, innescando cambiamenti conformazionali irreversibili. Riferimenti correlati: PMID:32703818, PMID:34159616
• Le modificazioni post-traduzionali includono glicosilazione, legami disolfuro e palmitoilazione, che sono critiche per struttura e funzione.
• Localizzazione subcellulare: membrana del virione, membrana del compartimento intermedio ER-Golgi dell'ospite e membrana cellulare dell'ospite.
• Contiene un dominio di legame al recettore (RBD) all'interno della subunità S1 che interagisce direttamente con ACE2, rendendolo un bersaglio chiave per anticorpi neutralizzanti.
• Può agire come un superantigene e inibire le risposte immunitarie innate dell'ospite, contribuendo all'evasione immunitaria virale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende il dominio di legame al recettore (aa 332-550) della proteina spike di SARS-CoV-2, rendendo questo anticorpo adatto per rilevare l'RBD in saggi come western blotting (WB), ELISA e immunoprecipitazione (IP).
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), considerare la validazione dell'anticorpo in linee cellulari infette o cellule trasfettate con spike in condizioni appropriate di fissazione e permeabilizzazione.
• Essendo un anticorpo policlonale, può riconoscere più epitopi sull'RBD; eseguire titolazione e includere controlli appropriati (es. lisati cellulari negativi, controlli isotipo) per garantire la specificità.
• È riportata reattività crociata per SARS-CoV-2; la reattività con altri coronavirus o varianti dovrebbe essere confermata sperimentalmente.
• Il peso molecolare previsto della proteina spike a lunghezza intera è di circa 141 kDa; tuttavia, le forme clivate o glicosilate possono migrare in modo diverso; considerare l'utilizzo di un controllo positivo.

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