Anticorpo policlonale di coniglio contro la spike S1 di SARS-CoV-2 per WB, ELISA - P59594

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della glicoproteina Spike (S1)

• Identità proteica: La glicoproteina Spike di SARS-CoV, nota anche come E2 o proteina peplomerica, è una proteina di fusione virale di classe I da 139 kDa, essenziale per l'ingresso del virus.
• Attacco e ingresso: La subunità S1 media l'attacco ai recettori della cellula ospite (ad esempio ACE2 umano e CLEC4M/DC-SIGNR), avviando l'infezione e la successiva internalizzazione del virus negli endosomi.
• Fusione: Dopo l'endocitosi, la proteolisi mediata dalla catepsina CTSL smaschera il peptide di fusione nella subunità S2, portando alla fusione della membrana tra la membrana virale e quella della cellula ospite.
• Meccanismo di fusione: La proteina transita attraverso almeno tre stati conformazionali: nativo pre-fusione, intermedio pre-pinna di capelli e pinna di capelli post-fusione; le regioni a coiled-coil formano una struttura trimerica di pinne di capelli per promuovere l'apposizione delle membrane.
• Peptide di fusione virale: Una breve regione all'interno di S2, esposta dopo la scissione, si inserisce direttamente nelle membrane dell'ospite per promuovere la fusione.
• Evasione immunitaria: Downregola la tetherina ospite (BST2) tramite degradazione lisosomiale per contrastare l'attività antivirale.
• Localizzazione subcellulare: Presente sulla membrana del virione, sulla membrana del compartimento intermedio tra reticolo endoplasmatico e apparato di Golgi dell'ospite e sulla membrana cellulare dell'ospite; classificata come proteina dell'involucro virale e proteina transmembrana a elica.
• Modifiche chiave: È una glicoproteina con ponti disolfuro, palmitoilazione (lipoproteina) e un peptide segnale; le caratteristiche strutturali includono domini a coiled-coil essenziali per la fusione.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 1–100 all'estremità N-terminale della subunità S1; la popolazione di anticorpi risultante può riconoscere epitopi lineari all'interno di questa regione, inclusi potenziali siti di glicosilazione.
• Per il Western blotting, si consiglia di utilizzare condizioni riducenti e non riducenti per valutare l'impatto dei ponti disolfuro sulla disponibilità dell'epitopo, e di convalidare con lisati di cellule infettate da SARS-CoV o proteina spike ricombinante.
• Nelle applicazioni ELISA, la natura policlonale garantisce avidità; testare sia il formato diretto che quello di cattura, e includere antigeni di controllo appropriati (ad esempio S1 ricombinante, trimero della S) per confermare la specificità.
• La reattività crociata riportata con SARS-CoV suggerisce un potenziale riconoscimento ampio tra coronavirus correlati; potrebbe essere necessaria una convalida aggiuntiva con le varianti della spike di SARS-CoV-2.

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