Anticorpo policlonale coniglio anti-SARS-CoV-2 Spike S1 per WB, IF/ICC, IP, ELISA - P0DTC2

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Spike S1 del SARS-CoV-2

• La glicoproteina spike (S) del SARS-CoV-2 media l'ingresso virale legandosi al recettore dell'ospite ACE2 (PubMed:32142651, PubMed:32155444, PubMed:33607086) e innescando la fusione della membrana. Riferimenti correlati: PMID:32142651, PMID:32155444, PMID:33607086
• Viene sintetizzata come precursore e scissa nelle subunità S1 e S2; S1 contiene il dominio di legame del recettore, mentre S2 media la fusione (PubMed:34561887). Riferimenti correlati: PMID:34561887
• L'ingresso virale può avvenire tramite fusione diretta alla membrana cellulare dopo il clivaggio di S2' da parte di TMPRSS2, o tramite endocitosi facilitata dalla catepsina L (CSTL) (PubMed:32075877, PubMed:32221306, PubMed:32703818, PubMed:34159616). Riferimenti correlati: PMID:32075877, PMID:32221306, PMID:32703818, PMID:34159616
• I recettori alternativi includono NRP1/NRP2 (PubMed:33082294, PubMed:33082293), integrine (PubMed:35150743) e ASGR1 (PubMed:34837059), il che potrebbe spiegare il tropismo per l'epitelio olfattivo (PubMed:33082293). Riferimenti correlati: PMID:33082294, PMID:33082293, PMID:35150743, PMID:34837059
• La proteina S è una proteina di fusione virale di classe I che subisce cambiamenti conformazionali irreversibili dagli stati pre-fusione a post-fusione, guidati dalla formazione di coil a elica ripetuti eptadici (PubMed:34561887). Riferimenti correlati: PMID:34561887
• La localizzazione subcellulare include la membrana del virione, la membrana del compartimento intermedio tra reticolo endoplasmatico e apparato di Golgi dell'ospite e la membrana cellulare dell'ospite.
• La proteina è pesantemente glicosilata, contiene ponti disolfuro ed è palmitoilata, con un peso molecolare di ~141 kDa.
• Le parole chiave evidenziano i ruoli nell'adesione virale, fusione della membrana, evasione immunitaria e attività superantigenica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 11–682 all'interno del dominio N-terminale della subunità S1; pertanto, questo anticorpo è adatto per rilevare la subunità S1 o la spike a lunghezza intera in condizioni di Western blot denaturanti/riducenti. Ci si aspetta una banda a ~141 kDa per la spike a lunghezza intera, con potenziali bande inferiori che rappresentano S1 (~75–80 kDa) dopo il clivaggio.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), considerare l'ottimizzazione delle condizioni di permeabilizzazione poiché la proteina spike transita attraverso il reticolo endoplasmatico-Golgi e si localizza alla membrana plasmatica.
• Questo anticorpo è stato validato per applicazioni di immunoprecipitazione (IP); confermare la compatibilità con il tuo tampone di lisi e i livelli di espressione del bersaglio.
• Nell'ELISA, considerare l'abbinamento con un anticorpo specifico per S2 per differenziare la spike a lunghezza intera dalla S1 rilasciata, il che è rilevante nello sviluppo di saggi diagnostici.
• Validare sempre l'anticorpo nel sistema di campione pertinente (ad es. cellule infette da SARS-CoV-2, cellule trasfette con spike o proteina ricombinante) e includere i controlli appropriati.

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