Anticorpo policlonale anti-dominio RBD della Spike di SARS-CoV per WB, ELISA - P59594

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del RBD della Spike di SARS-CoV

• La glicoproteina Spike di SARS-CoV (nota anche come E2 o proteina peplomerica) è codificata dal gene S ed è essenziale per l'ingresso del virus nelle cellule ospiti.
• Media l'adesione virale legandosi ai recettori dell'ospite, l'enzima di conversione dell'angiotensina 2 (ACE2) e CLEC4M/DC-SIGNR, inducendo l'internalizzazione del virione negli endosomi.
• Dopo il legame al recettore e l'attivazione proteolitica da parte delle catepsine dell'ospite, la proteina Spike agisce come proteina di fusione virale di classe I, favorendo la fusione tra le membrane virale e della cellula ospite.
• Il dominio di legame al recettore (RBD), situato all'interno della subunità S1, è direttamente responsabile dell'interazione con ACE2 e rappresenta un importante bersaglio degli anticorpi neutralizzanti.
• La proteina presenta inoltre funzioni immunomodulanti, come la riduzione della tetherina dell'ospite (BST2) attraverso la degradazione lisosomiale, per contrastare le risposte immunitarie innate antivirali.
• A livello subcellulare, la glicoproteina Spike si localizza nella membrana del virione, nella membrana del compartimento intermedio reticolo endoplasmatico-Golgi (ERGIC) dell'ospite e nella membrana della cellula ospite.
• È ampiamente modificata post-traduzionalmente e presenta glicosilazione, legami disolfuro e palmitoilazione, elementi fondamentali per la sua struttura e funzione.
• Parole chiave aggiuntive: immunoevasione virale, inibizione della risposta immunitaria innata dell'ospite e fattore di virulenza.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per generare questo anticorpo è un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 350-450 del RBD della Spike (sulla base dell'accession NP_828851.1); considerare questa regione epitopica nella progettazione dei test di rilevazione.
• Questo anticorpo policlonale è adatto per applicazioni di Western blot (WB) ed ELISA; gli utilizzatori devono ottimizzare i fattori di diluizione e convalidarne le prestazioni nelle proprie matrici di campione.
• Data la reattività crociata osservata con SARS-CoV, l'anticorpo potrebbe riconoscere anche le proteine Spike di ceppi strettamente correlati, ma la reattività con altri coronavirus deve essere valutata sperimentalmente.
• Per la rilevazione mediante WB, il peso molecolare previsto della glicoproteina Spike a lunghezza intera è di circa 139 kDa, ma possono essere osservati prodotti di scissione o bande di degradazione a seconda della preparazione del campione.
• Nell'ELISA, l'abbinamento di questo anticorpo con un adeguato anticorpo di cattura o con una strategia di rivestimento con antigene mirata al RBD può aumentare la sensibilità del test; considerare titolazioni preliminari a scacchiera.

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