Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-SARS-CoV Spike RBD per WB e ELISA - P59594

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Glicoproteina Spike

• La glicoproteina Spike (S) del SARS-CoV, nota anche come E2 o proteina peplomerica, è una proteina di fusione virale di classe I che media l'ingresso del virus nelle cellule ospiti.
• Essa attacca il virione alla membrana della cellula ospite interagendo con i recettori dell'ospite, principalmente l'enzima di conversione dell'angiotensina 2 (ACE2) e CLEC4M/DC-SIGNR, avviando l'infezione.
• Dopo il legame del recettore e l'internalizzazione del virus negli endosomi, la proteina S subisce cambiamenti conformazionali. Il clivaggio proteolitico da parte della catepsina L dell'ospite (CTSL) rivela il peptide di fusione, consentendo la fusione delle membrane virali ed endosomiali.
• La proteina S funge anche da immuno-evasina virale down-regolando la tetherin dell'ospite (BST2) attraverso la degradazione lisosomiale, contrastando la risposta immunitaria innata dell'ospite.
• A livello subcellulare, la proteina Spike è localizzata sulla membrana del virione, sulla membrana della cellula ospite e sulla membrana del compartimento intermedio tra reticolo endoplasmatico e apparato di Golgi dell'ospite.
• Le caratteristiche strutturali chiave includono un peptide segnale, un ectodominio grande contenente il dominio di legame del recettore (RBD), regioni a ripetizione eptadica che formano una struttura a trimero di forcucce a elica (coiled-coil), un dominio transmembrana e una coda citoplasmatica. È glicosilata per legame N, contiene legami disolfuro ed è palmitoilata.
• La glicoproteina Spike è essenziale per l'ingresso del virus, la virulenza e l'immuno-evasione, rendendola un bersaglio principale per i reagenti diagnostici e lo sviluppo di vaccini.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 350-450 all'interno del RBD della proteina Spike, quindi questo anticorpo potrebbe rilevare la proteina Spike a lunghezza intera (~139 kDa) o la subunità S1 clivata in WB in condizioni riducenti o non riducenti.
• Per la WB, considerare l'uso di SDS-PAGE con controlli appropriati come la proteina Spike ricombinante o lisati di cellule infette da SARS-CoV. Validare l'anticorpo nel sistema di campione pertinente per confermare la specificità.
• Per ELISAs, possono essere progettati saggi di cattura o rilevamento utilizzando la proteina RBD o Spike ricombinante. I tamponi di rivestimento ottimali e le diluizioni degli anticorpi devono essere determinati sperimentalmente.
• A causa della specificità per il RBD, questo anticorpo potrebbe essere utile nei saggi di neutralizzazione o competizione, ma tali applicazioni richiedono una validazione individuale.

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