Anticorpo policlonale Anti-SAV1 per WB, ELISA - Q9H4B6

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di SAV1

• SAV1 (Omologo della proteina salvatore 1, noto anche come hWW45) è una proteina impalcatura di 45 kDa contenente domini WW e un componente principale della via di segnalazione Hippo, che controlla le dimensioni degli organi e sopprime la tumorigenesi accoppiando la proliferazione cellulare all'apoptosi (PubMed:29063833). Riferimenti correlati: PMID:29063833
• SAV1 forma un complesso con le chinasi STK3/MST2 e STK4/MST1, facilitando la loro attivazione e la successiva fosforilazione del complesso LATS1/2-MOB1, che a sua volta fosforila e trattiene i co-attivatori trascrizionali oncogenici YAP1 e WWTR1/TAZ nel citoplasma, impedendo il loro ingresso nucleare e l'espressione genica pro-crescita.
• Oltre alla segnalazione canonica Hippo, SAV1 regola la disgiunzione del centrosoma controllando la localizzazione di NEK2 ai centrosomi, influenzando la fosforilazione di CROCC e CEP250, e modula anche l'attività trascrizionale del recettore degli estrogeni alfa (ESR1) attraverso la fosforilazione dipendente da STK3/MST2.
• SAV1 si localizza sia nel nucleo che nel citoplasma, coerente con i suoi ruoli duali nella regolazione trascrizionale e nelle funzioni di impalcatura chinasi citoplasmatica.
• La proteina è espressa ubiquitariamente nei tessuti umani adulti, con i livelli più alti nel pancreas, nell'aorta e nel setto interventricolare, e i più bassi nel muscolo scheletrico; l'espressione è aumentata nel cuore fetale rispetto al cuore adulto, suggerendo ruoli nello sviluppo.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione, e la proteina presenta un dominio a elica alfa (coiled-coil) e ripetizioni del dominio WW (parole chiave: Fosfoproteina, Coiled coil, Repeat, Struttura 3D).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo policlonale di coniglio è stato prodotto contro una proteina di fusione ricombinante che comprende gli amminoacidi 199-383 di SAV1 umano (NP_068590.1), che copre la regione C-terminale contenente il dominio a elica alfa e le ripetizioni del dominio WW importanti per le interazioni proteina-proteina.
• Per il Western blotting, SAV1 ha un peso molecolare previsto di ~45 kDa; si consiglia di utilizzare controlli di carico appropriati e di confermare la dimensione della banda in lisati cellulari pertinenti (es. HeLa, HEK293 o campioni di tessuto murino).
• Per l'ELISA, considerare l'ottimizzazione della concentrazione dell'antigene di rivestimento e della diluizione dell'anticorpo utilizzando protocolli ELISA indiretti standard.
• Dato che l'anticorpo reagisce sia con l'umano che con il topo, è adatto per studi comparativi in queste specie; tuttavia, si consiglia la validazione nel sistema sperimentale specifico.
• Si noti che SAV1 è espresso in molti tessuti, quindi considerare l'utilizzo di linee cellulari con livelli di espressione noti come controlli positivi.

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