Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-SCN1B per WB, ELISA - Q07699

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di SCN1B

• SCN1B codifica per la subunità regolatoria beta-1 del canale del sodio, una proteina transmembrana contenente un dominio immunoglobulina che funge da subunità accessoria per i canali del sodio voltaggio-dipendenti. Modula la cinetica di gate e l'espressione di membrana di Nav1.1, Nav1.2, Nav1.3, Nav1.4, Nav1.5, Nav1.6, Nav1.7 e Nav1.8. Riferimenti correlati: PMID:14622265 PMID:15525788 PMID:18464934
• Oltre al suo ruolo modulatore sui canali, SCN1B funziona come una molecola di adesione cellulare (CAM) cruciale per la migrazione neuronale e la ricerca del percorso durante lo sviluppo cerebrale. Stimola l'allungamento dei neuriti. Riferimenti correlati: PMID:21994374
• La proteina esiste in più isoforme dovute a splicing alternativo. L'isoforma 1 è abbondantemente espressa nel muscolo scheletrico, cuore e cervello, mentre l'isoforma 2 è altamente espressa nel cervello e nel muscolo scheletrico con livelli inferiori in altri tessuti. Nel cervello, l'isoforma 2 predomina nel cervelletto, e l'isoforma 1 è più alta nella corteccia cerebrale.
• SCN1B si localizza alla membrana cellulare, al pericarione, all'assone e ad altre proiezioni cellulari, e può anche essere secreta. Questa distribuzione diffusa supporta sia le sue funzioni regolatorie sui canali ionici che quelle adesive.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione e legami disolfuro, come indicato dalle parole chiave. La proteina è associata a diverse malattie umane, tra cui epilessia (DEE52, EIEE52, GEFSP1), fibrillazione atriale (ATFB13) e sindrome di Brugada (BRGDA5), sottolineando la sua importanza clinica.
• Il peso molecolare calcolato per l'isoforma 1 è di circa 24.7 kDa, mentre la banda derivata dall'immunogeno viene rilevata a 25 kDa nel western blot.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il western blot, utilizzare condizioni standard riducenti o non riducenti poiché SCN1B contiene legami disolfuro. Ottimizzare gli agenti di blocco (es. latte scremato al 5% o BSA) e la diluizione dell'anticorpo primario (iniziare da 1:500–1:2000) utilizzando lisati da tessuti di cervello, cuore o muscolo scheletrico umano, di topo o di ratto dove il bersaglio è altamente espresso.
• A causa della natura glicoproteica e delle potenziali modifiche post-traduzionali, potrebbe essere osservato uno shift di banda; validare la dimensione della banda rilevata (circa 25 kDa) rispetto al peso molecolare previsto.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di rilevamento; associarlo a un anticorpo di cattura abbinato per saggi sandwich. Validare il legame testando la proteina SCN1B ricombinante o lisati tissutali.
• Quando si studia l'espressione isoforma-specifica, verificare la reattività utilizzando controlli positivi isoforma-specifici o confermare la posizione dell'epitopo all'interno della sequenza immunogena (aa 19–160) presente in entrambe le principali isoforme.

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