Anticorpo policlonale di coniglio Anti-Sec23B per WB, IF/ICC, ELISA - Q15437

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Sec23B

• Sec23B è una proteina di trasporto proteico, nota anche come proteina correlata a SEC23 B, codificata dal gene SEC23B. È un componente centrale del complesso della proteina di rivestimento II (COPII) che media la gemmazione delle vescicole dal reticolo endoplasmatico (RE).
• Insieme a Sec24, Sec23B forma lo strato interno del rivestimento COPII, promuovendo la deformazione fisica della membrana del RE in vescicole di trasporto e l'imballaggio selettivo delle molecole di carico destinate al complesso di Golgi.
• Sec23B mostra attività di proteina GTPasi-activante (GAP) verso la piccola GTPasi Sar1, che è fondamentale per l'assemblaggio e lo smontaggio del rivestimento durante la formazione delle vescicole.
• La proteina è espressa in modo ubiquitico in tutti i tessuti umani, sottolineando il suo ruolo fondamentale nella via secretoria e nella biogenesi delle membrane.
• A livello subcellulare, Sec23B si localizza sulle vescicole citoplasmatiche, in particolare sulle membrane delle vescicole rivestite da COPII, sulla membrana del RE e nel citosol.
• Le modifiche post-traduzionali includono l'acetilazione; le mutazioni nel gene SEC23B sono associate all'anemia diseritropoietica congenita di tipo II (CDAII), un'anemia emolitica ereditaria caratterizzata da eritropoiesi inefficace e eritroblasti binucleati.
• Sec23B ha un peso molecolare di circa 86 kDa e contiene motivi di legame dello zinco, che la classificano come metalloproteina zinco-dipendente.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico derivato dai residui 150–250 della Sec23B umana, una regione conservata tra uomo, topo e ratto, che giustifica la reattività crociata osservata.
• Per il Western blotting (WB), dovrebbe essere rilevata una banda corrispondente al peso molecolare previsto di 86 kDa. Si consiglia di testare un intervallo di diluizioni dell'anticorpo (ad esempio 1:500–1:2000) e di convalidare con controlli positivi e negativi appropriati nel proprio sistema di campioni.
• Nell'immunofluorescenza/immunicitochimica (IF/ICC), ci si aspetta un pattern di colorazione coerente con la distribuzione del RE e delle vescicole COPII. Studi di co-localizzazione con marcatori di organelli (ad esempio marcatori del compartimento intermedio RE-Golgi) possono aiutare a confermare la specificità.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per la cattura o la rivelazione. Eseguire titolazioni a scacchiera per determinare le concentrazioni ottimali di rivestimento e di anticorpo.
• Poiché Sec23B è espressa in modo ubiquitico, la maggior parte delle linee cellulari in coltura (ad esempio HeLa, HEK293, NIH/3T3) dovrebbe contenere il bersaglio. Assicurarsi che il buffer di lisazione e il protocollo siano compatibili con le proteine associate alla membrana.

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