Anticorpo monoclonale coniglio anti-Semaphorin-4D/CD100 per IF/ICC, FC, ELISA - Q92854

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Semaphorin-4D

• La Semaphorin-4D (nota anche come CD100, A8, BB18, GR3) è una proteina di membrana di tipo I a passaggio singolo che esiste sia in forma legata alla membrana che secreta. Appartiene alla famiglia delle semaforine e contiene un dominio immunoglobulinico.
• Agisce come recettore di superficie cellulare per le plessine PLXNB1 e PLXNB2, mediando la segnalazione cellula-cellula importante per la neurogenesi e la regolazione immunitaria. Riferimenti correlati: PMID:20877282
• Nel sistema nervoso, modula l'outgrowth e l'arborizzazione dei neuriti tramite l'attivazione di RHOA attraverso PLXNB1 e promuove lo sviluppo delle sinapsi inibitorie GABAergiche. Riferimenti correlati: PMID:19788569
• Guida la migrazione delle cellule granulari del cervelletto e la migrazione delle cellule endoteliali tramite la segnalazione SRC-PTK2B-AKT. Riferimenti correlati: PMID:16055703
• Nel sistema immunitario, induce l'aggregazione delle cellule B e ne migliora la vitalità in vitro, evidenziando un ruolo nella biologia dei linfociti. Riferimenti correlati: PMID:8876214
• Espressa ad alto livello nel muscolo scheletrico, nei linfociti del sangue periferico, nella milza e nel timo, con espressione inferiore nel cervello, nel rene e in altri tessuti; non rilevata nel colon e nel fegato.
• Modificata post-traduzionalmente mediante glicosilazione e fosforilazione; soggetta a splicing alternativo. A livello subcellulare si localizza sulla membrana cellulare ed è anche secreta.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre l'intero dominio extracellulare (aa 22-734), suggerendo che l'anticorpo rileva probabilmente epitopi extracellulari. Per la citometria a flusso, considerare l'uso di cellule vive, non permeabilizzate per verificare la colorazione di superficie.
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), la localizzazione di membrana richiede una corretta permeabilizzazione con detergenti come Triton X-100 a basse concentrazioni. Validare i pattern di colorazione in linee cellulari note per esprimere la Semaphorin-4D.
• Nell'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; la reattività crociata con altri membri della famiglia delle semaforine deve essere valutata se si lavora con campioni biologici complessi.
• A causa dello splicing alternativo e della glicosilazione, il peso proteico osservato nel western blot può variare; se si utilizza questo anticorpo per il western blot, validare con i controlli appropriati e considerare che l'immunogeno è una proteina ricombinante.

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