Anticorpo policlonale coniglio Anti-SERCA2/ATP2A2 per WB, IHC-P - P16615

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di SERCA2/ATP2A2

• La ATPase 2 del calcio del reticolo sarcoplasmatico/endoplasmatico (SERCA2), anche nota come pompa del calcio 2, è codificata dal gene ATP2A2 e appartiene alla famiglia delle ATPasi di trasporto cationico di tipo P. Lo splicing alternativo genera più isoforme con espressione tessuto-specifica.
• SERCA2 è un enzima dipendente da magnesio che catalizza l'idrolisi dell'ATP accoppiata alla traslocazione degli ioni calcio dal citosol nel lume del reticolo sarcoplasmatico o endoplasmatico, processo essenziale per l'omeostasi del calcio intracellulare. Riferimenti correlati: PMID:12542527 PMID:16402920
• Questa pompa svolge un ruolo chiave nel ciclo contrazione/rilassamento delle cellule muscolari, regolando la ricaptazione del calcio nel reticolo sarcoplasmatico.
• Al di là del muscolo, SERCA2 è coinvolta nell'autofagia: dopo l'interazione con VMP1, controlla i contatti tra reticolo endoplasmatico e membrana di isolamento necessari per la formazione degli autofagosomi e modula i contatti con gocce lipidiche, mitocondri ed endosomi. Riferimenti correlati: PMID:28890335
• Negli osteoclasti, SERCA2 agisce come regolatore della segnalazione del calcio mediata da TNFSF11 tramite interazione con TMEM64, promuovendo l'attivazione di NFATC1 e la generazione di ROS mitocondriali, critici per la differenziazione degli osteoclasti.
• Subcellularmente, SERCA2 si localizza sulla membrana del reticolo endoplasmatico e sulla membrana del reticolo sarcoplasmatico, riflettendo il suo ruolo nell'immagazzinamento e nella segnalazione del calcio intracellulare.
• L'espressione tissutale varia: l'isoforma 1 è ampiamente espressa nel muscolo liscio e nei tessuti non muscolari (alto livello nel fegato, pancreas, polmone), mentre le isoforme 2 e 3 si trovano prevalentemente nel muscolo cardiaco e nel muscolo scheletrico a contrazione lenta.
• Le modifiche post-traduzionali chiave includono il legame nucleotidico, la fosforilazione e i ponti disolfuro; la proteina è anche soggetta a nitrazione, come indicato da numerosi studi proteomici.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Questo anticorpo policlonale è stato prodotto contro un frammento ricombinante che copre gli amminoacidi 111-253 di SERCA2/ATP2A2 umano (regione conservata). Può riconoscere più isoforme e reagisce in modo crociato con SERCA2 di topo e ratto, come confermato sperimentalmente.
• Per Western blot, aspettarsi una banda intorno a 115 kDa. Ottimizzare le condizioni riducenti/non riducenti e considerare controlli di caricamento da tessuti con elevata espressione di SERCA2 (es. fegato, cuore).
• Per immunoistochimica (sezioni di paraffina), utilizzare metodi appropriati di recupero antigenico e validare la colorazione in tessuti noti per esprimere SERCA2. Includere controlli tissutali positivi e negativi.
• Per applicazioni ELISA, utilizzare l'immunogeno ricombinante o la proteina purificata come antigene di rivestimento. Verificare le condizioni di rivestimento e le serie di diluizione dell'anticorpo.
• Come per ogni anticorpo policlonale, la consistenza tra lotti deve essere verificata per saggi quantitativi. Si consiglia di eseguire esperimenti pilota quando si cambia lotto.

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