Anticorpo policlonale anti-SET1A per WB, ELISA - O15047

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di SET1A

• SET1A, noto anche come KMT2F o subunità SET1 del complesso di metiltransferasi degli istoni Set1/Ash2, è una N-metiltransferasi della lisina degli istoni che mono-, di- e trimetila specificamente la 'Lys-4' dell'istone H3 (H3K4me1, me2, me3) utilizzando la S-adenosil-L-metionina come donatore di metile (PubMed:12670868, PubMed:25561738). Riferimenti correlati: PMID:12670868 PMID:25561738
• È un componente fondamentale del meccanismo di rimodellamento della cromatina e stabilisce i marcatori di metilazione H3K4 nei siti di cromatina attiva per regolare i processi di trascrizione e riparazione del DNA (PubMed:29937342, PubMed:31197650, PubMed:32346159). Riferimenti correlati: PMID:29937342 PMID:31197650 PMID:32346159
• SET1A è essenziale per l'arricchimento di H3K4me3 nei promotori e per la programmazione trascrizionale delle cellule staminali della massa cellulare interna e dei progenitori neuronali durante l'embriogenesi (per similarità) (PubMed:31197650). Riferimenti correlati: PMID:31197650
• In corrispondenza delle forcelle di replicazione bloccate, SET1A catalizza H3K4me1 e media il rimodellamento dei nucleosomi dipendente da FANCD2, stabilizzando i nucleofilamenti di RAD51 per proteggere le forcelle invertite dalla degradazione (PubMed:29937342, PubMed:32346159). Riferimenti correlati: PMID:29937342 PMID:32346159
• SET1A non metila H3K4 se il residuo adiacente 'Lys-9' è già metilato, indicando una specificità per il substrato (PubMed:12670868). Riferimenti correlati: PMID:12670868
• Si lega a diversi RNA coinvolti nell'elaborazione dell'RNA e nella risposta al danno del DNA, suggerendo un ruolo nel collegamento tra la modificazione della cromatina e il metabolismo dell'RNA (PubMed:38003223). Riferimenti correlati: PMID:38003223
• A livello subcellulare, SET1A è localizzata negli speckle nucleari, sui cromosomi e anche nel citoplasma, mentre le sue funzioni principali vengono svolte nei siti della cromatina.
• Appartiene alla superfamiglia delle metiltransferasi che legano il SAM, simile alla classe V, ed è implicata nei disturbi del neurosviluppo, poiché le mutazioni sono associate a epilessia e disabilità intellettiva.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, si prevede una banda intorno a 186 kDa; si consiglia di utilizzare un protocollo di trasferimento per proteine ad alto peso molecolare e controlli positivi appropriati (ad esempio, estratti nucleari di linee cellulari umane o murine).
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per rilevare SET1A ricombinante o nativa; si raccomanda di ottimizzare l'antigene di rivestimento e le condizioni di rilevazione.
• A causa dell'elevato peso molecolare, un tempo di trasferimento prolungato e gel a bassa percentuale possono migliorare la rilevazione nel WB.
• La reattività crociata con il topo suggerisce l'utilità negli studi su modelli murini; è necessario validare la reattività nel tessuto o nel tipo cellulare desiderato.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra diversi lotti deve essere valutata per i saggi quantitativi critici.

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