Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-SETDB1 (Convalidato KO) per WB, IF-P, ELISA - Q15047

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di SETDB1

• SETDB1, anche noto come ESET o KMT1E, è un'istone-lisina N-metiltransferasi che specificamente trimetila la lisina 9 dell'istone H3 (H3K9me3), un segno distintivo della repressione trascrizionale. Riferimenti correlati: PMID:11959841, PMID:12869583, PMID:14536086
• Funziona principalmente nell'eucromatina per silenziare i geni, accoppiando H3K9me3 con la metilazione del DNA attraverso interazioni con MBD1 e ATF7IP, e questa repressione viene mantenuta ereditariamente durante la replicazione del DNA tramite CAF-1. Riferimenti correlati: PMID:12869583, PMID:14536086, PMID:27237050
• SETDB1 viene reclutato sulla cromatina da TRIM28/KAP1, che è diretto da proteine a dita di zinco KRAB, ed è essenziale per la formazione dell'eterocromatina mediata da HUSH e il silenziamento genico. Riferimenti correlati: PMID:24623306, PMID:27732843
• Nelle cellule staminali embrionali, SETDB1 mantiene la repressione di geni e retrovirus endogeni, cooperando con TRIM28 per la deposizione di H3K9me3 indipendentemente dalla metilazione del DNA. Riferimenti correlati: PMID:24623306, PMID:37938770
• SETDB1 catalizza anche la mono- e dimetilazione di H3K9 nel citoplasma su istoni liberi prima dell'assemblaggio della cromatina. Riferimenti correlati: PMID:26405197
• Si localizza prevalentemente nel nucleo ma si trova anche nel citoplasma e si associa ai cromosomi.
• Un isoforma generata da splicing alternativo manca dei domini chiave della metiltransferasi ed è cataliticamente inattiva.
• Ampiamente espresso con i livelli più alti nel testicolo.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 1–397); l'anticorpo può riconoscere la proteina SETDB1 a lunghezza intera (~143 kDa) e possibilmente frammenti N-terminali.
• La convalida KO suggerisce un'elevata specificità; i ricercatori dovrebbero includere controlli di knockout o knockdown nella loro configurazione sperimentale per confermare la specificità nei propri sistemi.
• Per il Western blotting, utilizzare un marcatore ad alto peso molecolare e considerare tempi di trasferimento lunghi o gel a bassa percentuale per la proteina di 143 kDa.
• Per l'immunofluorescenza/IF-P, ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione per rilevare SETDB1 nucleare/cromosomico.
• In ELISA, verificare la reattività incrociata se si utilizzano specie diverse da umano, topo o ratto.

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