Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-SF3A3 per WB, ELISA - Q12874

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di SF3A3

• SF3A3 (Splicing Factor 3A Subunità 3), noto anche come SF3a60, SAP61, PRP9 o PRPF9, è una componente da 59 kDa del subcomplesso SF3A all'interno della piccola ribonucleoproteina nucleare U2 (snRNP) dello spliceosoma (UniProt Q12874).

• Svolge un ruolo centrale nel splicing del pre-mRNA come parte del complesso 17S U2 snRNP, che partecipa direttamente all'assemblaggio iniziale dello spliceosoma riconoscendo il sito di ramificazione dell'introne e promuovendo la selezione dell'adenosina del sito di ramificazione, il nucleofilo per la prima fase di transesterificazione. Riferimenti correlati: PMID:10882114, PMID:11533230, PMID:32494006

• SF3A3 contribuisce alla formazione del complesso E del pre-spliceosoma e del complesso A dello spliceosoma pre-catalitico e rimane associato durante la formazione dei complessi B dello spliceosoma pre-catalitico. Riferimenti correlati: PMID:10882114, PMID:11533230, PMID:29360106, PMID:30315277

• Subcellolarmente, SF3A3 è localizzato nei speck nucleari e nel nucleoplasma, in linea con il suo ruolo di accumulo dei fattori di splicing e nei siti di trascrizione attiva.

• La proteina è espressa ubiquitous in tutti i tessuti ed è soggetta a modifiche post-traduzionali tra cui fosforilazione e acetilazione, come identificato dagli studi di proteomica.

• SF3A3 contiene domini a dito di zinco e coordina ioni zinco, indicando funzioni di legame metallico che possono stabilizzare la struttura proteica o mediare le interazioni all'interno dello spliceosoma.

• Il complesso SF3A, composto da SF3A1, SF3A2 e SF3A3, è essenziale per il reclutamento di U2 snRNP e l'associazione stabile con il pre-mRNA; carenze di SF3A3 alterano la fedeltà dello splicing e possono portare alla formazione di trascritti aberranti.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico mappato sulla regione N-terminale (aa 1-100) di SF3A3 umano. Per Western blotting è attesa una banda specifica vicino a 59 kDa; si consigliano estratti nucleari o lisati cellulari totali provenienti da linee cellulari umane (es. HeLa, HEK293) o murine. Si consiglia di pre-validare l'anticorpo nel sistema di campionamento specifico.

• Per applicazioni ELISA, l'immunogeno peptidico può essere utilizzato come antigene di rivestimento; tuttavia, la rilevazione di SF3A3 nativo in campioni complessi può richiedere ottimizzazione. Si consiglia di abbinarlo a un anticorpo di rilevazione che bersagli un epitopo non sovrapposto.

• La reattività incrociata è stata riportata per uomo e topo; se necessario, confermare la reattività in altre specie, poiché l'omologia di sequenza varia.

• Utilizzare appropriati controlli negativi (es. knockdown con siRNA) per verificare la specificità nel tuo contesto sperimentale.

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