Anticorpo Monoclonale Anti-SF3B1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O75533

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di SF3B1

• SF3B1 codifica la subunità 1 del fattore di splicing 3B, noto anche come SF3b155, SAP 155 e Prp10, la subunità di 155 kDa del complesso SF3B all'interno dello spliceosoma U2 snRNP. Riferimenti bibliografici: PMID:12234937, PMID:27720643, PMID:32494006
• Partecipa direttamente all'assemblaggio precoce dello spliceosoma e media il riconoscimento del sito di diramazione dell'introne promuovendo la selezione dell'adenosina del punto di diramazione, il nucleofilo per la prima fase dello splicing. Riferimenti bibliografici: PMID:32494006, PMID:34822310, PMID:36104565
• In quanto parte del sottocomplesso SF3B, SF3B1 è necessario per la formazione del complesso pre-spliceosomiale 'A' tramite il legame stabile dell'U2 snRNP alla sequenza del punto di diramazione. Riferimenti bibliografici: PMID:12234937, PMID:36104565
• SF3B1, insieme a SF3A, si lega a monte del sito di diramazione in modo indipendente dalla sequenza, ancorando U2 snRNP al pre-mRNA. Riferimenti bibliografici: PMID:12234937
• La proteina contribuisce anche all'assemblaggio del complesso 'E' e funziona all'interno dello spliceosoma minore, che processa gli introni di tipo U12. Riferimenti bibliografici: PMID:10882114, PMID:15146077, PMID:33509932
• SF3B1 si localizza nel nucleo e si concentra nei speckle nucleari, domini subnucleari arricchiti di fattori di splicing.
• Le modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione, citrullinazione, fosforilazione e ubiquitinazione, suggeriscono molteplici livelli di controllo regolatorio sulla sua attività di splicing.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 1–100 dell'SF3B1 umano; l'anticorpo può riconoscere la regione N-terminale e si prevede che reagisca con la proteina full-length di ~146 kDa.
• Per applicazioni western blot, si consiglia di utilizzare un gel SDS-PAGE a bassa percentuale e ottimizzare le condizioni di trasferimento per proteine ad alto peso molecolare. Includere marcatori di peso molecolare appropriati.
• In immunistochimica (IHC-P) e immunofluorescenza (IF/ICC), ci si aspetta un pattern di colorazione prevalentemente nucleare con arricchimento puntato; validare i protocolli di fissazione e recupero dell'antigene nel proprio sistema tissutale o cellulare.
• La reattività crociata con ortologhi di topo e ratto suggerisce un'elevata conservazione della sequenza nella regione dell'immunogeno; in ogni caso, si raccomanda una verifica sperimentale individuale.
• Le prestazioni in ELISA devono essere validate utilizzando la proteina ricombinante o il peptide corrispondente alla regione dell'immunogeno come controllo positivo.

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