Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-SF3B1 per WB, IF/ICC, ELISA - O75533

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di SF3B1

• SF3B1, noto anche come SAP155, SF3b155 e PRPF10, è un componente centrale del complesso 17S U2 snRNP dello spliceosoma maggiore, che catalizza la rimozione degli introni dai pre-mRNA (PubMed:12234937, PubMed:27720643, PubMed:32494006).
  Riferimenti correlati: PMID:12234937, PMID:27720643, PMID:32494006
• All'interno dell'U2 snRNP, SF3B1 fa parte del sottocomplesso SF3B che è essenziale per l'assemblaggio del complesso 'A' e il legame stabile alla sequenza del punto di diramazione (branchpoint) (PubMed:12234937, PubMed:36104565).
  Riferimenti correlati: PMID:12234937, PMID:36104565
• SF3B1 riconosce direttamente l'adenosina del sito di diramazione, il nucleofilo per il primo passo dello splicing, garantendo una precisa selezione del sito di splicing (PubMed:32494006, PubMed:34822310, PubMed:36104565).
  Riferimenti correlati: PMID:32494006, PMID:34822310, PMID:36104565
• I sottocomplessi SF3A e SF3B, insieme a SF3B1, ancorano l'U2 snRNP al pre-mRNA attraverso un legame indipendente dalla sequenza a monte del sito di diramazione (PubMed:12234937).
  Riferimenti correlati: PMID:12234937
• SF3B1 è anche un componente dello spliceosoma minore, che processa i rari introni di tipo U12 (PubMed:15146077, PubMed:33509932).
  Riferimenti correlati: PMID:15146077, PMID:33509932
• Insieme ad altri componenti dell'U2 snRNP, SF3B1 può partecipare all'elaborazione selettiva dei microRNA dai trascritti primari, come pri-miR-17-92 (Per similarità).
• SF3B1 si localizza prevalentemente nel nucleo e nelle speckles nucleari, e la sua attività è regolata da multiple modificazioni post-traduzionali, inclusa fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde ai primi 144 amminoacidi di SF3B1 umano; pertanto, l'anticorpo riconosce principalmente epitopi all'interno di questa regione. Considerare l'accessibilità dell'epitopo in condizioni denaturanti vs. native durante la progettazione degli esperimenti.
• Per il western blot (WB), SF3B1 migra a circa 146 kDa; assicurarsi una percentuale di gel adeguata e condizioni di trasferimento ottimali per proteine ad alto peso molecolare.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), ci si aspetta un pattern di colorazione nucleare e delle speckles nucleari; ottimizzare fissazione e permeabilizzazione per preservare l'antigenicità.
• È stata riportata reattività crociata per umano, topo e ratto; verificare la reattività nel proprio specifico sistema campione se si lavora con altre specie o tessuti.
• Le applicazioni ELISA possono richiedere una titolazione accurata sia degli anticorpi di cattura che di rilevamento quando utilizzati in formati sandwich; questo anticorpo policlonale può essere adatto come reagente di rilevamento.

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