Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-SFTPD (Proteina Surfattante D) per WB, ELISA - P35247

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di SFTPD (SP-D)

• La proteina D associata al surfactante polmonare (SP-D), codificata dal gene SFTPD (conosciuto anche come COLEC7, PSPD, SFTP4), è un membro della famiglia delle collectine appartenente alla superfamiglia delle lectine di tipo C.
• SP-D svolge un ruolo fondamentale nella difesa immunitaria innata del polmone: lega microrganismi inalati, antigeni organici e tossine tramite il suo dominio di riconoscimento dei carboidrati, interagendo con lipopolisaccaridi batterici, oligosaccaridi e acidi grassi.
• La proteina modula la funzione dei leucociti nelle risposte immunitarie e può partecipare alla riorganizzazione o al turnover del surfactante polmonare, contribuendo al mantenimento dell'omeostasi alveolare.
• SP-D è una proteina secreta localizzata nello spazio extracellulare e nella matrice, specificamente abbondante nel film superficiale polmonare dove si interfaccia con le barriere aria-liquido.
• L'espressione tissutale di SFTPD è rilevata in modo prominente nel polmone, con un'espressione aggiuntiva osservata nel cervello, nel pancreas e negli adipociti maturi del tessuto adiposo.
• La proteina presenta caratteristiche strutturali che includono un dominio a fascio coiled-coil, una regione simile al collagene e legami disolfuro; subisce modifiche post-traduzionali come idrossilazione, glicosilazione e S-nitrosilazione e richiede calcio per la sua attività lectinica.
• SP-D lega fortemente il maltosio e altre porzioni alfa-glucosiliche, il che può facilitare il riconoscimento dei carboidrati della superficie microbica.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico; per il WB, assicurarsi che l'anticorpo riconosca la proteina nativa full-length in condizioni denaturanti e riducenti, dato il peso molecolare previsto di ~38 kDa (umano). Validare lisati da tessuto polmonare o linee cellulari rilevanti.
• Per l'ELISA, considerare di utilizzare la proteina ricombinante SP-D o il peptide come antigene di rivestimento e testare diverse concentrazioni di anticorpo per ottenere una sensibilità ottimale. Si ricorda che SP-D è secreta, quindi terreni di coltura condizionati o liquido di lavaggio broncoalveolare possono rappresentare fonti di campioni naturali.
• La reattività crociata con topo e ratto è stata confermata; quando si utilizzano queste specie, verificare le dimensioni delle bande in WB, poiché gli ortologhi di topo e ratto hanno pesi molecolari simili ma possono presentare leggere differenze. Si raccomandano esperimenti pilota con controlli positivi corrispondenti alla specie utilizzata.
• Dato che SP-D contiene domini lectina dipendenti dal calcio, la presenza di calcio nei tamponi può influenzare il legame dell'anticorpo in determinati formati di test; se si ottengono risultati inconsistenti, considerare di effettuare prove sia con che senza chelanti del calcio.

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