Anticorpo policlonale coniglio anti-SGCE per WB, ELISA - O43556

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'Epsilon-sarcoglycano (SGCE)

• La SGCE (epsilon-sarcoglycano) è un membro della famiglia delle sarcoglicane, glicoproteine transmembrana, codificata dal gene SGCE, conosciuta anche come ESG e DYT11.
• Come parte del complesso delle sarcoglicane all'interno del complesso distrofina-glicoproteina (DGC), la SGCE costituisce un legame meccanico fondamentale tra il citoscheletro di F-actina intracellulare e la matrice extracellulare, essenziale per l'integrità delle fibre muscolari.
• La SGCE è espressa in modo ubiquitario in tutti i tessuti, riflettendo il suo ruolo fondamentale nella stabilità della membrana cellulare.
• La proteina si localizza prevalentemente sulla membrana cellulare e sul sarcolemma, ma si trova anche nel citoplasma, associata al citoscheletro, all'interno dell'apparato di Golgi e nei dendriti.
• Le modificazioni post-traduzionali comprendono la glicosilazione N-linked e la coniugazione ubiquitina-simile, che possono regolare la stabilità della proteina e le sue interazioni.
• Le mutazioni nella SGCE sono associate alla sindrome mioclono-distonia (DYT11), un disturbo neurologico del movimento, che evidenzia il suo ruolo anche al di fuori del muscolo.
• Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme, che potenzialmente diversificano le sue funzioni specifiche per tessuto.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno (aa 1–317) bersaglia la regione N-terminale extracellulare della SGCE umana, che è altamente conservata nel topo, consentendo la reattività crociata prevista; quando si utilizzano modelli non umani, verificare l'omologia della sequenza per la specie di interesse.
• Per applicazioni di Western blot, denaturare e ridurre i campioni bollendoli nel buffer di caricamento con SDS e aspettarsi una banda a ~50 kDa; ottimizzare la diluizione dell'anticorpo primario (ad esempio, 1:500–1:2000) mediante titolazione.
• Nell'ELISA, considerare di rivestire con proteina o peptide ricombinante di SGCE e titolare l'anticorpo per ottenere un rapporto segnale-rumore ottimale; questo formato è adatto per lo screening ad alto rendimento.
• L'anticorpo è prodotto in coniglio, quindi sono necessari anticorpi secondari compatibili (anti-coniglio); evitare di utilizzare anticorpi secondari di topo se vengono analizzati direttamente tessuti di topo.
• La pre-adsorbimento o il blocco contro l'immunogeno possono ridurre il background non specifico; utilizzare agenti di blocco appropriati (ad esempio, 5% di latte scremato o BSA).

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