Anticorpo policlonale anti-SH3PXD2A per WB, IF/ICC, ELISA - Q5TCZ1

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di SH3PXD2A

• SH3PXD2A (proteina contenente domini SH3 e PX 2A) è una proteina adattatrice nota anche come TKS5, FISH e SH3MD1. Appartiene alla famiglia TKS e contiene un dominio PX N-terminale e cinque domini SH3 C-terminali, con splicing alternativo che genera molteplici isoforme.
• La proteina è uno scaffold chiave nella formazione di invadopodi e podosomi, facilitando la degradazione della matrice extracellulare (ECM) e promuovendo l'invasività delle cellule tumorali. Si lega a metalloproteinasi della matrice (ADAM), NADPH ossidasi (NOX) e fosfoinositidi. Riferimenti correlati: PMID:27789576
• SH3PXD2A organizza la generazione di specie reattive dell'ossigeno (ROS) dipendenti da NOX1 o NOX3 e localizza i ROS negli invadopodi, contribuendo alla segnalazione cellulare e al rimodellamento della matrice.
• In associazione con ADAM12, SH3PXD2A media l'effetto neurotossico del peptide beta-amiloide, collegandolo ai processi neurodegenerativi.
• La proteina si localizza nel citoplasma e si concentra nelle proiezioni cellulari, in particolare nei podosomi, ed è rilevata nelle giunzioni cellulari.
• È espressa prevalentemente nelle linee cellulari tumorali, con livelli elevati riscontrati nei carcinomi mammari invasivi e nei melanomi.
• Un'ampia fosforilazione regola la funzione di SH3PXD2A e la sua struttura 3D è stata caratterizzata. La proteina presenta regioni coiled-coil e ripetizioni del dominio SH3.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 806–1105, coprendo la regione C-terminale ricca di domini SH3. Questo design mira a un'area funzionalmente critica, ma è necessario considerare la potenziale variabilità delle isoforme e convalidare il riconoscimento nel proprio sistema sperimentale specifico.
• Per il Western blotting, aspettarsi una banda intorno a 125 kDa; tuttavia, modifiche post-traduzionali o isoforme possono produrre bande aggiuntive. Utilizzare controlli positivi appropriati (ad es. linee cellulari tumorali invasive) e confermare la specificità con campioni knockdown o knockout.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, l'anticorpo dovrebbe marcare i podosomi e le regioni citoplasmatiche. Utilizzare protocolli di fissazione e permeabilizzazione idonei e co-colorare con marcatori di podosomi (ad es. cortactina) per confermare la localizzazione.
• Per l'ELISA, abbinare questo anticorpo a un anticorpo di cattura se si progetta un saggio sandwich e ottimizzare le condizioni di rivestimento utilizzando frammenti di SH3PXD2A ricombinante.
• A causa della reattività crociata con il topo, è possibile convalidare i modelli utilizzando tessuti o linee cellulari di topo, ma confrontare sempre i pattern di espressione con i database noti.

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