Anticorpo policlonale di coniglio anti-SHARPIN per WB, ELISA - Q9H0F6

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di SHARPIN

• SHARPIN (proteina interagente con il dominio RH associato a SHANK, nota anche come SIPL1) è un componente del complesso di assemblaggio delle catene di ubiquitina lineari (LUBAC), che catalizza la formazione di catene di poliubiquitina legate a Met1 (lineari), essenziali per la segnalazione NF-kappa-B e la regolazione dell'infiammazione.
  Riferimenti correlati: PMID:21455173, PMID:21455180, PMID:21455181
• Il complesso LUBAC coniuga la poliubiquitina lineare a molecole chiave della segnalazione, come IKBKG (NEMO) e RIPK1, attivando così le vie canoniche NF-kappa-B e JNK e proteggendo le cellule dall'apoptosi indotta da TNF.
  Riferimenti correlati: PMID:21455173, PMID:21455180, PMID:21455181
• SHARPIN partecipa alla difesa immunitaria innata rivestendo i batteri citosolici con catene di ubiquitina lineari, che agiscono come segnale di «mangiami» per la xenofagia e promuovono l'attivazione di NF-kappa-B.
  Riferimenti correlati: PMID:28481331
• Insieme alla deubiquitinasi OTULIN, il complesso LUBAC modula la segnalazione canonica Wnt durante l'angiogenesi.
  Riferimenti correlati: PMID:23708998
• La proteina SHARPIN si localizza nel citoplasma, nel citosol e nelle sinapsi e contiene un dominio zinc-finger oltre a molteplici siti di fosforilazione.
• SHARPIN è altamente espressa nel muscolo scheletrico e nella placenta, con livelli inferiori nel cervello, nel cuore, nel colon, nel timo, nella milza, nei reni, nel fegato, nei polmoni e nei leucociti del sangue periferico; la sua espressione è sovraregolata in diversi tessuti tumorali, inclusi i tumori del rene, del fegato, dell'ovaio e del pancreas.
• Lo splicing alternativo di SHARPIN genera molteplici isoforme e la proteina è soggetta a fosforilazione e legame ai metalli, in linea con il suo ruolo nella coniugazione dell'ubiquitina e nella segnalazione intracellulare.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla porzione N-terminale (aa 1-126) di SHARPIN umano; si consideri che questa regione potrebbe essere conservata e che quindi l'anticorpo potrebbe riconoscere molteplici isoforme e mostrare reattività crociata con SHARPIN di topo e ratto, come indicato.
• Per il Western blotting, si prevede una banda intorno a 40 kDa; tuttavia, prodotti di scissione o forme modificate post-traduzionalmente possono generare bande aggiuntive. Ottimizzare i controlli di caricamento e convalidare la specificità nel tessuto o nella linea cellulare pertinente.
• Adatto per ELISA; utilizzare condizioni appropriate di blocco e rilevazione e confermare la linearità impiegando standard di proteina ricombinante.

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