Anticorpo policlonale coniglio anti-SHOX per WB, ELISA - O15266

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della SHOX

• SHOX (proteina homeobox della bassa statura), nota anche come proteina osteogenica pseudoautosomica contenente homeobox, è un fattore di trascrizione codificato dal gene SHOX (PHOG). Lo splicing alternativo genera multiple isoforme coinvolte nella regolazione della crescita.
• SHOX attiva direttamente la trascrizione di NPPB (peptide natriuretico B) nelle cellule osteogeniche, un meccanismo critico per il controllo degli aspetti fondamentali della crescita. Riferimenti correlati: PMID:11751690, PMID:17881654
• Si lega preferenzialmente a elementi del DNA contenenti la sequenza palindromica 5'-TAATNNNATTA-3', funzionando probabilmente come fattore di trascrizione omodimerico. Riferimenti correlati: PMID:11751690
• La proteina contiene un dominio homeobox e appartiene alla famiglia di fattori di trascrizione homeobox, localizzandosi prevalentemente nel nucleo.
• SHOX è altamente espresso nei fibroblasti del midollo osseo, nelle cellule dell'osso trabecolare e nella placca di crescita, in particolare nei condrociti ipertrofici. Viene anche rilevato nella placenta, nel muscolo scheletrico, nel pancreas, nel cuore e nel rene fetale. Nella cartilagine del ginocchio, l'espressione tende ad essere più alta negli uomini rispetto alle donne.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la fosforilazione e le mutazioni nel gene SHOX sono associate a displasie scheletriche e sindromi da bassa statura (es. discondrosteosi di Léri-Weill, displasia mesomelica di Langer).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 20-110) di SHOX umano, che è conservata nel topo e nel ratto, supportando la cross-reattività riportata. Quando si lavora con queste specie, validare la rilevazione nel proprio sistema sperimentale specifico.
• Per il Western blot, prevedere una banda a circa 32 kDa. Utilizzare un marcatore del peso molecolare e ottimizzare la percentuale del gel e le impostazioni di trasferimento per proteine in questo intervallo.
• Nell'ELISA, la proteina ricombinante utilizzata come immunogeno può essere impiegata come antigene di rivestimento per confermare la specificità e il titolo dell'anticorpo.
• Data la localizzazione nucleare della SHOX, considerare l'utilizzo di protocolli di estrazione nucleare o frazionamento subcellulare per arricchire il bersaglio e migliorare il segnale negli assay basati sulle cellule.
• Come per qualsiasi anticorpo policlonale, può verificarsi variabilità da lotto a lotto; includere sempre controlli appropriati e titolare l'anticorpo per prestazioni ottimali nei propri assay.

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