Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-SIRT1 (convalidato KO) per WB, IF/ICC, ELISA - Q96EB6

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di SIRT1

• SIRT1 è una deacetilasi proteica NAD-dipendente che agisce come sensore metabolico chiave, collegando la regolazione trascrizionale allo stato energetico intracellulare e coordinando diversi processi cellulari come ciclo cellulare, risposta al danno del DNA, metabolismo, apoptosi e autofagia.
  Riferimenti correlati:
  PMID:11672523, PMID:12006491, PMID:14976264
• Modula la funzione della cromatina attraverso la deacetilazione degli istoni H1, H2A e H3 e promuove alterazioni nella metilazione degli istoni, portando alla repressione trascrizionale.
  Riferimenti correlati:
  PMID:15469825
• SIRT1 deacetila un'ampia gamma di fattori di trascrizione e co-regolatori, tra cui p53, FOXO1/3/4, NF-κB, PGC-1α e altri, regolando quindi l'espressione genica target sia in modo positivo che negativo.
  Riferimenti correlati:
  PMID:14976264, PMID:14980222, PMID:15152190, PMID:11672523, PMID:12006491, PMID:15692560, PMID:16892051
• Svolge un ruolo fondamentale nella risposta e nella riparazione del danno del DNA deacetilando proteine di riparazione come XRCC6/Ku70, WRN, APEX1 e NBN, facilitandone il reclutamento o l'attività; reprime anche l'espressione dei geni di riparazione del DNA.
  Riferimenti correlati:
  PMID:15205477, PMID:16998810, PMID:17334224, PMID:20097625, PMID:19934257
• SIRT1 è un componente del complesso eNoSC ed è coinvolto nel silenziamento dell'rDNA, nella formazione dell'eterocromatina e nella regolazione della lunghezza dei telomeri, contribuendo alla stabilità genomica.
  Riferimenti correlati:
  PMID:18485871, PMID:21504832, PMID:15469825, PMID:18004385
• La localizzazione subcellulare include nucleo, corpi di PML, citoplasma e mitocondri, con shuttling nucleo-citoplasmatico osservato in risposta a diversi segnali. È implicato nella regolazione del ritmo circadiano deacetilando le proteine core dell'orologio e gli istoni nei promotori dei geni orologio.
  Riferimenti correlati:
  PMID:18662546
• L'impianto alternativo produce più isoforme, tra cui un'isoforma cataliticamente inattiva (75SirT1) che può regolare l'apoptosi, e le due isoforme principali collaborano per regolare l'attività di p53.
• Oltre alla deacetilazione, SIRT1 agisce come deacilasi proteica-lisina che media la delattilazione, depropionilazione e decrotonilazione di proteine bersaglio come TEAD1, YAP1 e istoni.
  Riferimenti correlati:
  PMID:28497810, PMID:38512451

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un pepitide sintetico; si consiglia di utilizzare saggi di competizione peptidica per confermare la specificità nel proprio sistema sperimentale.
• Per la WB, il peso molecolare previsto è ~82 kDa; ottimizzare il blocco e la diluizione dell'anticorpo per i lisati cellulari (si suggerisce di iniziare con una diluizione 1:1000 secondo i protocolli standard).
• Per IF/ICC, le condizioni di fissazione e permeabilizzazione possono influenzare l'accessibilità all'epitopo; testare sia la fissazione con paraformaldeide che quella con metanolo.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per cattura o rilevazione, ma si raccomanda la convalida dell'accoppiamento con una coppia di anticorpi corrispondente adatta.

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