Anticorpo policlonale Anti-SKP2 per WB, IF/ICC, ELISA - Q13309

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di SKP2

• SKP2 (proteina associata alla chinasi della fase S 2), noto anche come p45, FBL1, FBXL1, è un componente di riconoscimento del substrato del complesso ubiquitina ligasi E3 SCF (SKP1-CUL1-proteina F-box) che media l'ubiquitinazione e la degradazione proteasomale di proteine bersaglio coinvolte nella progressione del ciclo cellulare, nella trasduzione del segnale e nella trascrizione. Riferimenti correlati: PMID:9736735, PMID:11931757, PMID:12435635
• SKP2 riconosce specificamente CDKN1B/p27kip fosforilato, promuovendone la degradazione per regolare la transizione G1/S; questo processo richiede anche il cofattore CKS1.
• Bersaglia un'ampia gamma di substrati, tra cui ORC1, CDT1, RBL2, KMT2A/MLL1, CDK9, RAG2, NBN, FOXO1, UBP43, YTHDF2 e probabilmente MYC, TOB1 e TAL1. La degradazione di TAL1 richiede la collaborazione con l'ubiquitina ligasi E3 STUB1. Riferimenti correlati: PMID:11931757, PMID:12435635, PMID:12769844, PMID:17962192
• In complesso con la ciclina E (CCNE1 o CCNE2) e CDK2, SKP2 riconosce e promuove l'ubiquitinazione di CDKN1A/p21. Riferimenti correlati: PMID:9736735, PMID:16262255
• In seguito a danno del DNA, SKP2 fosforilato media l'ubiquitinazione legata al Lys-63 di NBN, facilitando il reclutamento di ATM e promuovendo la riparazione per ricombinazione omologa. Riferimenti correlati: PMID:22464731
• SKP2 promuove anche l'ubiquitinazione dipendente da CK1 e la degradazione di CDH1 per regolare la migrazione cellulare, e presenta attività antivirale bersagliando NS5A del virus dell'epatite C per la degradazione proteasomale. Riferimenti correlati: PMID:22770219
• La proteina si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo ed è soggetta a modifiche post-traduzionali tra cui acetilazione e fosforilazione; contiene ripetizioni ricche di leucine caratteristiche delle proteine a scatola F.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 100–200 di SKP2 umano; verificare che questa regione sia sufficiente per rilevare il bersaglio nella vostra applicazione specifica e nel tipo di campione in uso.
• Per Western blot, si consiglia un intervallo di diluizione iniziale compreso tra 1:500 e 1:2000, e di ottimizzare in base ai livelli di espressione nel vostro modello. È prevista una banda vicino a 48 kDa.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, includere passaggi appropriati di fissazione e permeabilizzazione per rilevare SKP2 sia nel compartimento citoplasmatico che in quello nucleare.
• Per ELISA, valutare la compatibilità con il tampone di rivestimento e il sistema di rilevazione in uso, e valutare l'utilizzo di questo anticorpo come reagente di cattura o di rilevazione dopo la validazione dell'accoppiamento.
• Questo anticorpo è prodotto contro SKP2 umano; la reattività crociata con altre specie non è stata determinata. Validare la specificità se utilizzato con campioni non umani.

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