Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-SKP2 per Western Blot, IF/ICC, ELISA - Q13309

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di SKP2

• SKP2 (proteina 2 associata alla chinasi della fase S), nota anche come p45, proteina F-box Skp2, proteina 1 con ripetizioni F-box/LRR, p45skp2, è un componente di riconoscimento del substrato del complesso ligasi E3 proteina-ubiquitina SCF (SKP1-CUL1-proteina F-box).
• Funzione centrale nella proteolisi mediata dall'ubiquitina: media l'ubiquitinazione e la successiva degradazione proteasomica delle proteine bersaglio coinvolte nella progressione del ciclo cellulare, nella trasduzione del segnale e nella trascrizione. Svolge un ruolo critico nella transizione G1/S mirando alla degradazione di CDKN1B/p27kip fosforilata.
  Riferimenti correlati:
  PMID:9736735 PMID:11931757 PMID:12435635
• Riconosce un'ampia gamma di substrati, tra cui ORC1, CDT1, RBL2, KMT2A/MLL1, CDK9, RAG2, NBN, FOXO1, UBP43, YTHDF2, e probabilmente MYC, TOB1 e TAL1.
  Riferimenti correlati:
  PMID:11931757 PMID:12435635 PMID:12769844
• Promuove l'ubiquitinazione e la distruzione di CDH1 in modo dipendente da CK1, regolando così la migrazione cellulare.
  Riferimenti correlati:
  PMID:22770219
• In seguito a fosforilazione in risposta al danno al DNA, media l'ubiquitinazione legata a Lys-63 di NBN, promuovendo il reclutamento di ATM nei siti di danno al DNA e la riparazione del DNA tramite ricombinazione omologa.
  Riferimenti correlati:
  PMID:22464731
• Mostra attività antivirale attraverso la degradazione proteasomica mediata dall'ubiquitina della proteina non strutturale 5A del virus dell'epatite C.
• Localizzazione subcellulare: citoplasma e nucleo.
• Contiene ripetizioni ricche di leucina e partecipa alla via di coniugazione dell'ubiquitina; le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione e acetilazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno, un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 1–100 di SKP2 umano, è stato progettato dalla regione N‑terminale; considerare l'accessibilità dell'epitopo sia in condizioni denaturanti (WB) che native (IF/ICC, ELISA).
• In Western blot, è attesa una banda a circa 48 kDa (MW calcolata ~47.8 kDa). Validare la massa della banda rilevata nel proprio sistema campione.
• Per l'immunofluorescenza/ICC, ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione, poiché la natura policlonale può produrre segnale di fondo; includere controlli negativi appropriati.
• La reattività ELISA segnalata suggerisce l'utilità nel rilevare SKP2 nativo o ricombinante; eseguire esperimenti di titolazione per determinare la diluizione ottimale dell'anticorpo.
• È indicata reattività incrociata con SKP2 di topo e ratto; verificare le prestazioni in lisati o tessuti specifici per specie prima di saggi quantitativi.

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