Anticorpo Monoclonale Anti-SLC25A4/ANT1 per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P12235

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di SLC25A4/ANT1

• Identità proteica e isoforme: SLC25A4 codifica l'isoforma muscolo cardiaco/scheletrico della traslocasi ADP/ATP (ANT1), un membro della famiglia dei vettori mitocondriali. Nomi alternativi includono Adenina nucleotide traslocasi 1, proteina vettore ADP/ATP 1 e Solute carrier family 25 member 4.
• Funzione principale di antiporto: Catalizza lo scambio di ATP mitocondriale con ADP citosolico, un passaggio critico nella fornitura di energia cellulare. Il vettore opera tramite un meccanismo di accesso alternato, ciclando tra stati aperti al citoplasma e aperti alla matrice per trasportare un substrato alla volta. Riferimenti correlati: PMID:21586654 PMID:27693233 PMID:23173940
• Costruzione del poro di transizione di permeabilità mitocondriale (mPTP): Partecipa al poro di transizione di permeabilità mitocondriale, un canale non specifico che permeabilizza la membrana mitocondriale interna e innesca la morte cellulare. Riferimenti correlati: PMID:31883789
• Trasportore di protoni e termogenesi: Oltre allo scambio di nucleotidi, ANT1 può funzionare come trasportore di protoni, disaccoppiando così la respirazione dalla sintesi di ATP per generare calore. Questa attività di conduzione protonica è regolata dagli acidi grassi liberi ed è inibita dallo scambio ADP/ATP, posizionando ANT1 come regolatore principale dell'equilibrio della produzione di energia.
• Regolazione della mitofagia: Indipendentemente dalla sua attività di trasporto, ANT1 promuove la mitofagia interagendo con TIMM44, che inibisce la traslocasi della pre-sequenza mitocondriale TIM23 e stabilizza PINK1 sui mitocondri danneggiati.
• Localizzazione subcellulare: Risiede esclusivamente nella membrana interna mitocondriale, una proteina transmembrana con più domini transmembrana.
• Modifiche post-traduzionali e parole chiave: La proteina è soggetta ad acetilazione, fosforilazione, metilazione e S-nitrosilazione. Le annotazioni UniProtKB evidenziano i suoi ruomi nella cardiomiopatia, oftalmoplegia esterna progressiva e come fattore ospite nelle interazioni virali.
• Specificità tissutale: Espressa negli eritrociti nonché nel muscolo cardiaco e scheletrico (come indicato dal nome della sua isoforma).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che mira alla regione centrale (aa 100–200) di SLC25A4 umano. L'epitopo si trova in una regione conservata; la reattività incrociata con topo e ratto è supportata dall'allineamento delle sequenze. Validare la reattività con la specie del modello specifico se critico.
• Per il Western blotting, è prevista una banda principale a ~33 kDa. I lisati di controllo convalidati KO (es. HeLa o A549) possono confermare la specificità ed evitare segnali off-target.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), il pattern di colorazione dovrebbe essere citoplasmico con una distribuzione mitocondriale. Il recupero dell'antigene con tampone citrato (pH 6.0) può migliorare il rilevamento. Includere controlli di isotipo appropriati.
• L'anticorpo è adatto per immunoprecipitazione (IP) ed ELISA, rendendolo versatile per studi di interazione e saggi quantitativi. Quando si utilizza l'IP, considerare il cross-linking dell'anticorpo alle perle per evitare la co-elusione della catena pesante a ~55 kDa.
• Per saggi funzionali che alterano l'integrità mitocondriale, notare che ANT1 può influenzare l'apertura del mPTP; pertanto, la colorazione può essere influenzata dallo stato di stress cellulare.

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