Anticorpo policlonale di coniglio Anti-SLC5A7 per WB, IF-P, ELISA - Q9GZV3

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di SLC5A7

• SLC5A7 codifica il trasportatore di colina ad alta affinità 1 (CHT1/CHT), un simportere transmembrana dipendente da Na(+) e Cl(-) che media l'assorbimento di colina nei neuroni presinaptici con cinetica elettrogena e dipendente dalla tensione (PubMed:11027560, PubMed:11068039, PubMed:12237312, PubMed:17005849). Riferimenti correlati: PMID:11027560 PMID:11068039 PMID:12237312 PMID:17005849
• Questo trasportatore catalizza la fase limitante della sintesi di acetilcolina (ACh) recuperando la colina dalla fessura sinaptica, sostenendo così la neurotrasmissione colinergica e le funzioni cognitive (PubMed:11027560, PubMed:27569547). Riferimenti correlati: PMID:11027560 PMID:27569547
• CHT1 si localizza prevalentemente negli organelli presinaptici intracellulari (ad esempio endosomi precoci, vescicole sinaptiche) e si trasloca rapidamente sulla membrana plasmatica assonale in risposta all'attività neuronale per aumentare l'importazione di colina (PubMed:12969261, PubMed:15953352). Riferimenti correlati: PMID:12969261 PMID:15953352
• L'espressione è particolarmente evidente nei neuroni colinergici del putamen, del midollo spinale e della midolla, corrispondente alle regioni critiche per il controllo motorio e la regolazione autonomica (PubMed:11027560, PubMed:11068039, PubMed:27569547). Riferimenti correlati: PMID:11027560 PMID:11068039 PMID:27569547
• Mutazioni con perdita di funzione in SLC5A7 sono alla base della sindrome miastenica congenita (CMS20) e della neuropatia motoria ereditaria distale (HMN7A), evidenziando il suo ruolo essenziale nel mantenimento della giunzione neuromuscolare.
• Il trasportatore è una glicoproteina e una fosfoproteina, il che suggerisce una regolazione tramite modifiche post-traduzionali che possono influenzare il traffico e l'attività.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre il dominio citoplasmatico C-terminale (aa 503–580), il che può favorire il riconoscimento del trasportatore a lunghezza intera e minimizzare l'interferenza con il legame del substrato o le interazioni con i ligandi.
• Per il Western blot (WB) è consigliabile una serie di diluizioni per ottimizzare il segnale; il peso molecolare previsto è di circa 63 kDa, anche se la glicosilazione può modificare la mobilità apparente.
• Nell'immunofluorescenza (IF-P), una fissazione e permeabilizzazione accurate sono fondamentali perché la proteina risiede prevalentemente nelle vescicole intracellulari e nei terminali presinaptici, con solo una frazione esposta sulla membrana plasmatica.
• La reattività crociata con campioni di topo e ratto consente studi traslazionali, ma è necessario validare l'anticorpo nel sistema tissutale o cellulare di interesse prima di esperimenti su larga scala.
• L'anticorpo può essere utilizzato in saggi basati su ELISA dopo aver confermato la specificità; si consiglia di includere controlli positivi (ad esempio lisato di cervello) e negativi appropriati.

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