Anticorpo policlonale di coniglio anti-SLC8A2 (NCX2) per WB, ELISA - Q9UPR5

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione dello scambiatore sodio/calcio 2

• SLC8A2 (membro 2 della famiglia 8 dei trasportatori di soluti), noto anche come NCX2, è un membro della famiglia degli scambiatori sodio/calcio che media lo scambio elettrogenico di Ca²⁺ con Na⁺ attraverso la membrana plasmatica.
• Svolge un ruolo fondamentale nella rapida rimozione del Ca²⁺ citoplasmatico dopo l'eccitazione neuronale, modulando così la plasticità sinaptica, i processi di apprendimento e la memoria.
• Nel rene, SLC8A2 contribuisce alla regolazione dell'escrezione urinaria di Ca²⁺ e Na⁺, sottolineando il suo ruolo nell'omeostasi ionica sistemica.
• La proteina è localizzata prevalentemente nella membrana cellulare, con un arricchimento sulle superfici basolaterali delle cellule polarizzate, ed è inoltre presente nei pericari, nei dendriti e nelle spine dendritiche dei neuroni.
• SLC8A2 contiene molteplici domini transmembrana e un ampio loop citoplasmatico che ospita siti regolatori, tra cui un dominio di legame per la calmodulina e residui soggetti a fosforilazione.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione e fosforilazione, che possono modulare l'attività e il trasporto dello scambiatore.
• In qualità di antiportatore, è essenziale per mantenere basse concentrazioni di Ca²⁺ citosolico a riposo nelle cellule eccitabili e prevenire il sovraccarico di Ca²⁺, evidenziando il suo potenziale neuroprotettivo.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende una regione citoplasmatica centrale (aa 360-450) unica per SLC8A2 tra i membri della famiglia NCX; tuttavia, raccomandiamo di verificare la specificità mediante knockdown con siRNA o confrontando lisati knockout per SLC8A1/SLC8A3.
• Per il western blot, il peso molecolare previsto è di circa 100 kDa; utilizzare un gel SDS-PAGE al 7,5-10% e ottimizzare le condizioni di trasferimento, ad esempio mediante trasferimento umido con metanolo al 10%, per le proteine ad alto peso molecolare.
• Si prevede che l'anticorpo rilevi la proteina a lunghezza intera; bande aggiuntive più basse possono rappresentare frammenti proteolitici o forme immature: validare con controlli appropriati.
• Le prestazioni dell'ELISA dipendono dall'antigene utilizzato per il rivestimento; utilizzare frammenti ricombinanti del dominio extracellulare o citoplasmatico di SLC8A2 e ottimizzare il tampone di rivestimento e le condizioni di blocco.
• Poiché SLC8A2 è espresso prevalentemente nel cervello e nei reni, considerare l'utilizzo di lisati tissutali provenienti da queste fonti per la validazione primaria.
• Per gli studi di immunolocalizzazione, considerare che la proteina nativa è localizzata nelle spine dendritiche; assicurarsi che i protocolli di permeabilizzazione e fissazione siano compatibili con il rilevamento delle proteine di membrana.

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