Anticorpo policlonale di coniglio anti-Smad2 (validato KO) per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15796

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Smad2

• Il membro 2 della famiglia SMAD (Smad2), noto anche come JV18-1, hMAD-2 e omologo MAD 2, è un trasduttore di segnale intracellulare e modulatore trascrizionale di ~52 kDa.
• Funge come SMAD regolato dal recettore (R-SMAD) attivato dalle chinasi del recettore di tipo 1 del TGF-beta e dell'attivina, mediando la trasduzione del segnale dalla superficie cellulare al nucleo.
• Dopo la fosforilazione, Smad2 forma un complesso con SMAD4 e si trasloca nel nucleo, dove lega l'elemento TRE nei promotori dei geni responsivi al TGF-beta per regolare la trascrizione.
• Smad2 regola positivamente l'attività della chinasi PDPK1 promuovendone la dissociazione dalla proteina inibitoria 14-3-3 YWHAQ.
• Può agire come soppressore tumorale nel carcinoma colorettale, come indicato da studi che dimostrano la sua inattivazione in questi tumori. Riferimenti correlati: PMID:8752209
• La localizzazione subcellulare è principalmente citoplasmatica, ma si sposta nel nucleo dopo l'attivazione; viene rilevato nel nucleo anche in condizioni basali.
• Si osserva un'espressione elevata nel muscolo scheletrico, nelle cellule endoteliali, nel cuore e nella placenta, con ruoli tessuto-specifici nello sviluppo e nella differenziazione.
• Le modifiche post-traduzionali comprendono la fosforilazione (fondamentale per l'attivazione), l'acetilazione e l'ubiquitinazione, che regolano la sua stabilità, attività e interazioni proteiche.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 1-100) di Smad2 umano, che è conservata tra uomo, topo e ratto, a supporto della reattività crociata elencata.
• Per Western blotting (WB), la banda prevista si trova a circa 52 kDa; la validazione per knockout garantisce la specificità, ma è comunque consigliabile includere controlli positivi e negativi nei vostri esperimenti.
• In immistochimica (IHC-P) e immunofluorescenza (IF/ICC), considerare di ottimizzare il recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo per ogni tipo di tessuto, poiché i livelli di espressione di Smad2 variano.
• Per ELISA, la natura policlonale può aumentare la sensibilità, ma titrare l'anticorpo per determinare la concentrazione di lavoro ottimale per il vostro specifico formato di analisi.
• Poiché Smad2 è una proteina di segnalazione che può essere modificata post-traduzionalmente, assicurarsi che le condizioni di lisi e preparazione dei campioni preservino le modifiche rilevanti se si studiano gli stati di attivazione.

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