Anticorpo policlonale di coniglio anti-SMAD2/SMAD3 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15796/P84022

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di SMAD2/SMAD3

• SMAD2 è una proteina SMAD regolata dal recettore (R-SMAD), nota anche come MADH2, MADR2 e JV18-1, e presenta un'elevata omologia con SMAD3.
• Funziona come trasduttore intracellulare del segnale per le chinasi recettoriali di tipo 1 del TGF-beta e dell'attivina, mediando le risposte trascrizionali.
• Dopo la fosforilazione, SMAD2 forma un complesso con SMAD4, si trasferisce nel nucleo e si lega all'elemento TRE per regolare la trascrizione dei geni bersaglio.
• SMAD2 regola positivamente l'attività della chinasi PDPK1 stimolandone la dissociazione dalla proteina 14-3-3 YWHAQ.
• Può agire come soppressore tumorale nel carcinoma colorettale. Riferimenti correlati: PMID:8752209
• La localizzazione subcellulare è citoplasmatica e nucleare, con trasferimento tra i compartimenti in risposta all'attivazione della segnalazione.
• È altamente espresso nel muscolo scheletrico, nelle cellule endoteliali, nel cuore e nella placenta.
• È soggetto a modificazioni post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione e coniugazione con ubiquitina, che ne regolano l'attività e la stabilità.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico dagli amminoacidi 150-270 di SMAD2/SMAD3 umano (NP_005893.1); si consiglia di considerare l'allineamento delle sequenze per valutare la reattività crociata con altre specie o isoforme.
• Per il Western blot, si prevedono bande intorno a 52 kDa (SMAD2) e 48 kDa (SMAD3); bande aggiuntive possono rappresentare forme di splicing alternativo o proteine modificate post-traduzionalmente.
• Validare la specificità dell'anticorpo utilizzando il knockdown tramite siRNA, linee cellulari knockout o trattamento con fosfatasi per confermare i segnali dipendenti dalla fosforilazione.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P) e l'immunofluorescenza (IF/ICC), si raccomandano un recupero antigenico ottimale e la titolazione dell'anticorpo per ottenere il miglior rapporto segnale/rumore.
• L'ELISA può essere utilizzato per il rilevamento quantitativo; assicurarsi che i tamponi di rivestimento e le condizioni di incubazione appropriate siano ottimizzati in base al sistema di campioni pertinente.

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