Anticorpo monoclonale coniugato Anti-Smad3 da coniglio (Validato KO) per WB, IHC-P, ELISA - P84022

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Smad3

• Il membro 3 della famiglia SMAD (Smad3) è un trasduttore di segnale intracellulare e un modulatore trascrizionale attivato dalle chinasi del recettore di tipo 1 del TGF-beta (fattore di crescita trasformante) e dell'activina.
• Si lega all'elemento TRE nella regione promotrice di molti geni regolati dal TGF-beta e, formando il complesso SMAD3/SMAD4, attiva la trascrizione. Può anche assemblarsi in un complesso SMAD3/SMAD4/JUN/FOS al sito AP-1/SMAD per regolare la trascrizione mediata da TGF-beta.
• Smad3 regola negativamente la guarigione delle ferite, probabilmente modulando sia la crescita che la migrazione dei cheratinociti primari e alterando la chemiotassi dei monociti mediata da TGF-beta. Questo effetto sembra essere sensibile agli ormoni.
• Funge da regolatore della condrogenesi e dell'osteogenesi e inibisce la guarigione precoce delle fratture ossee.
• Smad3 regola positivamente l'attività chinasica di PDPK1 stimolandone la dissociazione dalla proteina 14-3-3 YWHAQ, che agisce come regolatore negativo.
• La proteina si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo.
• Le modificazioni post-traduzionali includono acetilazione, ADP-ribosilazione, fosforilazione e ubiquitinazione. Contiene domini di legame ai metalli e al DNA e partecipa alle interazioni ospite-virus.
• Lo splicing alternativo genera vari isoformi.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 100–200 di Smad3 umano (NP_005893.1). Quando si applica a specie non umane, confermare l'omologia di sequenza per garantire la reattività.
• Per il Western blot (WB), utilizzare controlli di caricamento appropriati e verificare la banda a circa 48 kDa; si raccomanda la validazione mediante knockout per confermare la specificità nei propri campioni.
• Per IHC-P, ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene e includere controlli tissutali sia positivi che negativi per validare i pattern di colorazione.
• Per le applicazioni ELISA, considerare l'abbinamento con un anticorpo di cattura o rilevamento adatto per formati sandwich e confermare le prestazioni utilizzando la proteina Smad3 ricombinante.
• La reattività crociata con topo e ratto è stata validata; tuttavia, si consiglia una verifica indipendente nel proprio sistema sperimentale specifico.

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