Anticorpo Policlonale Rabbit Anti-Smad3 per WB, IF/ICC, ELISA - P84022

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Smad3

• Il membro 3 della famiglia SMAD (Smad3), noto anche come omologo MAD 3 o hMAD-3, è un trasduttore di segnali intracellulare e modulatore trascrizionale codificato dal gene SMAD3 (MADH3).
• In quanto SMAD regolato da recettore (R-SMAD), Smad3 media la segnalazione di TGF-beta e activina legandosi alle chinasi del recettore di tipo 1.
• Dopo la fosforilazione, Smad3 forma un complesso con SMAD4, si trasloca nel nucleo e lega l'elemento TRE nelle regioni promotori per regolare la trascrizione dei geni bersaglio.
• Può anche interagire con i fattori di trascrizione AP-1 JUN/FOS per formare un complesso nei siti AP-1/SMAD, modulando così la trascrizione.
• Smad3 si sposta dinamicamente tra citoplasma e nucleo, e la sua localizzazione subcellulare è influenzata dinamicamente dall'attività di segnalazione.
• La proteina subisce molteplici modifiche post-traduzionali, tra cui fosforilazione, acetilazione, ADP-ribosilazione e ubiquitinazione, e contiene un dominio di legazione dello zinco.
• Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme, e Smad3 è coinvolto in processi come la guarigione delle ferite, la condrogenesi, l'osteogenesi e l'aneurisma aortico.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 150–250 della Smad3 umana, una regione che si prevede esposta e conservata tra uomo, topo e ratto, a supporto della reattività incrociata.
• Per il Western blot, è attesa una banda intorno a 48 kDa; convalidare la rilevazione nei lisati cellulari rilevanti e prendere in considerazione controlli appropriati per confermare la specificità.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione e usare una colorazione nucleare di contrasto per monitorare la traslocazione di Smad3 dopo stimolazione con TGF-beta.
• Per l'ELISA, abbinare l'anticorpo a un anticorpo di rilevazione corrispondente e testare diluizioni seriali di Smad3 ricombinante o campioni nativi per stabilire l'intervallo lineare e la sensibilità.

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