Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-SMG1 per WB e ELISA - Q96Q15

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di SMG1

• SMG1 è una chinasi proteica serina/treonina che svolge un ruolo centrale nella degradazione dell'mRNA mediata dal codone di stop (NMD) fosforilando UPF1/RENT1. Fa parte del complesso SMG1C insieme a SMG8 e SMG9.
• Viene reclutato sui ribosomi bloccati per formare il complesso SURF (SMG1-UPF1-eRF1-eRF3), che si associa al complesso di giunzione dell'esone (EJC) tramite UPF2 per innescare la NMD.
• Oltre alla NMD, SMG1 funziona anche nella risposta allo stress genotossico, fosforilando p53/TP53 e contribuendo all'attivazione ottimale di p53 dopo il danno al DNA. La sua deplezione porta a danni al DNA spontanei e a una maggiore sensibilità alle radiazioni ionizzanti.
• SMG1 si localizza sia nel nucleo che nel citoplasma.
• È ampiamente espresso, con i livelli più alti nel cuore e nel muscolo scheletrico, ed è presente anche nella placenta, nel cervello, nel polmone e nella milza, ma assente nel fegato.
• La proteina contiene un dominio di legame dell'ATP e richiede manganese come cofattore metallico. Subisce acetilazione e fosforilazione.
• Lo splicing alternativo genera multiple isoforme di SMG1.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una sequenza all'interno della regione C-terminale (aa 3562–3661) di SMG1 umano, distinta dal dominio chinasi, potenzialmente permettendo il rilevamento sia delle isoforme a lunghezza intera che troncate nel Western blot.
• Per il Western blot, a causa delle grandi dimensioni della proteina (~411 kDa), utilizzare un gel SDS-PAGE a bassa percentuale (es. 6% o gradiente) e tempi di trasferimento estesi per garantire un trasferimento efficiente della proteina ad alto peso molecolare.
• Validare le prestazioni dell'anticorpo in campioni di mouse se è necessaria la reattività crociata, poiché si riferisce che l'anticorpo cross-reagisce con SMG1 di topo.
• Per l'ELISA, considerare l'utilizzo dello stesso peptide come antigene di controllo positivo per stabilire le condizioni del saggio.
• Negli studi sulla NMD o sul danno al DNA, utilizzare controlli appropriati (es. stato di fosforilazione di UPF1) per confermare l'attività di SMG1 nel sistema sperimentale.

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