Anticorpo policlonale di coniglio anti-SMOX per WB, IHC-P, ELISA - Q9NWM0

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della spermine ossidasi (SMOX)

• SMOX (spermine ossidasi, nota anche come PAO1/PAOh1) è un enzima dipendente dal dinucleotide flavin-adeninico (FAD) che catalizza l'ossidazione della spermina a spermidina, producendo 3-aminopropanale e perossido di idrogeno. Può inoltre utilizzare N1-acetilspermina e spermidina come substrati, con affinità dipendenti dall'isoforma.
• L'enzima svolge un ruolo fondamentale nell'omeostasi delle poliammine, regolando i livelli intracellulari di spermina e spermidina, e influenza la sensibilità cellulare agli analoghi antitumorali delle poliammine.
• SMOX contribuisce alla produzione di beta-alanina attraverso la conversione del 3-aminopropanale mediata dall'aldeide deidrogenasi, collegando il catabolismo delle poliammine ad altre vie metaboliche.
• Gli studi sulla localizzazione subcellulare indicano che SMOX è presente sia nel citoplasma sia nel nucleo, suggerendo funzioni in distinti compartimenti cellulari.
• La proteina è ampiamente espressa nei tessuti, con livelli rilevabili nelle linee cellulari tumorali umane. Un'isoforma alternativa (isoforma 4) è stata identificata specificamente in una linea cellulare renale embrionale.
• SMOX appartiene alla famiglia delle ossidoreduttasi ed è una flavoproteina, che richiede FAD come cofattore. È soggetta a splicing alternativo, con conseguente produzione di molteplici isoforme dai ruoli funzionali potenzialmente diversi.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione che comprende gli amminoacidi 300–544 di SMOX umano, altamente conservata negli omologhi umano, murino e di ratto. Per il Western blot (WB), è prevista una banda intorno a 62 kDa; tuttavia, più isoforme possono produrre bande distinte, pertanto è necessario ottimizzare la preparazione dei campioni e i controlli di caricamento.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), considerare i metodi di recupero antigenico e la titolazione dell'anticorpo per ridurre al minimo il background, data l'ampia espressione tissutale di SMOX. Convalidare la specificità della colorazione mediante controlli appropriati.
• Per l'ELISA, assicurarsi che le condizioni di rivestimento e rilevamento siano adeguate; se la specificità è fondamentale, valutare la reattività crociata con altre poliammine ossidasi.
• Poiché SMOX è una flavoproteina, evitare agenti riducenti che potrebbero influenzare il legame del FAD se utilizzati in saggi funzionali.
• Convalidare il rilevamento nei sistemi di campionamento pertinenti, poiché l'espressione delle isoforme e la localizzazione subcellulare possono variare in base al tipo cellulare e alle condizioni di trattamento.

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