Anti-SMPD1 / ASM Anticorpo Policlonale per WB, IF/ICC, ELISA - P17405

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di SMPD1 / ASM

• Codificata dal gene SMPD1, la sfingomielinasi acida (aSMase) è una fosfodiesterasi della sfingomielina che catalizza la conversione della sfingomielina in ceramide. Riferimenti correlati: PMID:12563314, PMID:1840600, PMID:18815062

• L'enzima esiste in due forme derivate da un singolo precursore tramite trafficking alternativo: una destinata al compartimento endolisosomiale e l'altra rilasciata extracellulare; in condizioni di stress, l'esocitosi lisosomiale diventa una fonte principale della forma secreta. Riferimenti correlati: PMID:20807762, PMID:21098024, PMID:9660788, PMID:12563314, PMID:20530211

• All'interno dei lisosomi, aSMase converte la sfingomielina in ceramide, svolgendo un ruolo critico nell'esportazione del colesterolo dalle membrane intraendolisosomiali ed esibendo attività fosfolipasi C verso la 1,2-diacilglicerolfosfocolina e la 1,2-diacilglicerolfosfoglicerolo; modula anche l'apoptosi indotta da stress tramite la produzione di ceramide. Riferimenti correlati: PMID:20807762, PMID:21098024, PMID:25339683, PMID:8706124

• La forma secreta riorganizza l'architettura della membrana plasmatica generando ceramide, influenzando così la segnalazione cellulare e la difesa dell'ospite; la sua secrezione è regolata positivamente da mediatori dello stress e infiammatori come IL1B, IFNG e TNF. Riferimenti correlati: PMID:12563314, PMID:17303575, PMID:20807762, PMID:9393854

• Nelle cellule danneggiate, la forma lisosomiale viene rilasciata extracellulare in modo dipendente da Ca(2+), promuovendo l'endocitosi e la riparazione della membrana plasmatica; una forma clivata da CASP7 mostra un'attività potenziata, supportando ulteriormente la riparazione della membrana. Riferimenti correlati: PMID:20530211

• L'enzima è sfruttato da vari patogeni: infezioni batteriche (es. P. aeruginosa, N. gonorrhoeae) e virali (es. SARS-CoV, SARS-CoV-2, virus Ebola Zaire) ne innescano la secrezione, facilitando l'ingresso del patogeno tramite piattaforme di membrana arricchite di ceramide.

• Le mutazioni in SMPD1 portano alla malattia di Niemann-Pick di tipo A e B, caratterizzate da accumulo di sfingomielina e neurodegenerazione; la proteina si localizza nei lisosomi, nelle gocce lipidiche ed è secreta nello spazio extracellulare.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 70-340, coprendo una porzione ampia del dominio catalitico; si prevede quindi che l'anticorpo riconosca sia le forme precursore che quelle mature di aSMase.
• Per il Western blotting, è attesa una banda intorno a 70 kDa; tuttavia, glicosilazione e processamento possono dare origine a forme multiple, quindi convalidare nel sistema di campioni rilevante.
• Nelle applicazioni di immunofluorescenza e immunocitoistochimica, considerare la doppia localizzazione di aSMase (lisosomi e secreta); sono raccomandati fissaggio e permeabilizzazione appropriati.
• Le applicazioni ELISA possono essere ottimizzate utilizzando aSMase ricombinante come standard; la reattività crociata con gli ortopologhi di topo e ratto consente studi su più specie.

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