Anticorpo policlonale anti-SNAPIN per WB, IHC-P, ELISA - O95295

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di SNAPIN

• SNAPIN è una proteina associata SNARE che funge da componente del complesso di biogenesi degli organelli correlati ai lisosomi 1 (BLOC-1), essenziale per la normale biogenesi degli organelli correlati ai lisosomi (LRO) come i granuli densi delle piastrine e i melanosomi.
• In concerto con il complesso AP-3, il BLOC-1 contenente SNAPIN indirizza i carichi di proteine di membrana nelle vescicole per la consegna nei neuriti e nelle terminazioni nervose, ed è coinvolto nell'estensione dei neuriti.
• SNAPIN svolge un ruolo nel traffico vescicolare intracellulare e nel riciclaggio delle vescicole sinaptiche nelle cellule neuronali.
• Modula una fase tra l'allestimento, la fusione delle vescicole e il rilascio di neurotrasmettitori dipendente dal calcio attraverso la sua capacità di potenziare l'interazione della sinaptotagmina con le proteine SNARE e SNAP25. Riferimenti correlati: PMID:17182842, PMID:18167355
• Come parte del complesso BORC, SNAPIN contribuisce al movimento e alla localizzazione dei lisosomi alla periferia cellulare reclutando ARL8B e accoppiando i lisosomi ai motori chinesina diretti verso l'estremità positiva dei microtubuli. Riferimenti correlati: PMID:25898167
• SNAPIN è localizzato in più compartimenti cellulari, inclusi la membrana, il citoplasma, l'apparato di Golgi, il lisosoma e le membrane delle vescicole sinaptiche.
• A livello proteico, SNAPIN è espresso nelle cellule germinali maschili del testicolo adulto, suggerendo un ruolo nella spermatogenesi.
• SNAPIN è soggetto a modificazioni post-traduzionali come l'acetilazione e la fosforilazione, che possono regolare la sua funzione nell'esocitosi. Le mutazioni in SNAPIN sono associate a disabilità intellettiva, sottolineando la sua importanza nella funzione neuronale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre la proteina SNAPIN umana a lunghezza intera (amminoacidi 1–136), quindi ci si aspetta che l'anticorpo policlonale riconosca più epitopi. Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è di ~15 kDa; considerare l'uso di un gel SDS-PAGE al 12–15% e ottimizzare le condizioni di trasferimento per le proteine piccole.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), considerare di eseguire il recupero dell'antigene in tampone citrato (pH 6,0) o Tris-EDTA (pH 9,0), poiché SNAPIN è una proteina associata alla membrana. Una colorazione positiva può essere osservata nelle cellule neuronali cerebrali o nel testicolo, ma si consiglia la validazione nei propri campioni tissutali specifici.
• L'anticorpo presenta reattività crociata con topo e ratto, consentendo studi interspecie. Tuttavia, è consigliabile l'allineamento della sequenza della regione immunogenica tra le specie per confermare la conservazione dell'epitopo.
• Essendo un anticorpo policlonale, può verificarsi variabilità da lotto a lotto; per saggi quantitativi critici come l'ELISA, titolare ogni nuovo lotto per determinare la diluizione di lavoro ottimale.

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