Anticorpo policlonale di coniglio anti-SOD2 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P04179

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: superossido dismutasi [Mn], funzione e localizzazione mitocondriale

• SOD2 codifica la superossido dismutasi [Mn], un enzima della matrice mitocondriale che catalizza la dismutazione dei radicali superossido in ossigeno e perossido di idrogeno, svolgendo un ruolo primario nella difesa antiossidante.
• L'enzima richiede il manganese come cofattore per la propria attività catalitica, come indicato dalla parola chiave Metal-binding.
• SOD2 viene sintetizzata come precursore dotato di un peptide di transito, che ne dirige l'importazione nei mitocondri, dove viene scisso per generare la forma matura attiva (come indicato dalla parola chiave Transit peptide).
• A livello subcellulare, SOD2 si localizza specificamente nella matrice mitocondriale, in linea con il suo ruolo nella protezione dei mitocondri dai danni ossidativi.
• La proteina è soggetta a varie modificazioni post-traduzionali, tra cui acetilazione, nitrazione e coniugazione simile all'ubiquitina (derivate dalle parole chiave: Acetylation, Nitration, Ubl conjugation), che possono modulare la sua attività, stabilità o funzioni di segnalazione.
• Lo splicing alternativo del gene SOD2 produce molteplici varianti trascrizionali (come indicato dalla parola chiave Alternative splicing), contribuendo potenzialmente alla diversità delle isoforme e alla regolazione tessuto-specifica.
• In quanto enzima antiossidante fondamentale, SOD2 è coinvolta nelle risposte cellulari allo stress ossidativo; la sua disregolazione è associata a varie patologie, tra cui disturbi neurodegenerativi e cancro.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo è stato prodotto contro un frammento ricombinante corrispondente agli amminoacidi 25-222, che comprende la regione matura di SOD2; può rilevare sia la forma precursore sia quella matura, a seconda della preparazione del campione e dell'esposizione dell'epitopo.
• Per il Western blot, si prevede che l'anticorpo rilevi una banda a circa 25 kDa, corrispondente alla proteina SOD2 matura; in alcuni lisati cellulari o tissutali può essere osservata anche una banda a peso molecolare maggiore, rappresentativa del precursore.
• In immunoistochimica e immunofluorescenza, i pattern di colorazione mitocondriale devono essere verificati; si consiglia di eseguire una co-colorazione con un marcatore mitocondriale per confermare la specificità.
• Si raccomanda una pre-validazione delle condizioni di recupero antigenico e fissazione per ottenere risultati ottimali in IHC-P o IF/ICC, poiché la localizzazione di SOD2 può essere influenzata dal trattamento del campione.
• I protocolli ELISA possono essere sviluppati utilizzando l'immunogeno ricombinante come standard, ma è necessario valutare la reattività crociata con altre isoforme di SOD (ad esempio SOD1 e SOD3) per garantire la specificità del test.
• Data l'elevata omologia di sequenza tra le SOD2 umana, murina e di ratto, si prevede che l'anticorpo reagisca con tutte e tre le specie, come indicato; tuttavia, è consigliabile confermare la reattività nel sistema sperimentale specifico.

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